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添翼如虎

新虫 (小有名气)

[交流] PCR仪做连接 已有8人参与

弱弱的问一下,用PCR仪做连接,16摄氏度过夜,程序怎么设置呀?PCR仪连续开一晚上可以吗? 小妹这是第一次做克隆,实验室也没人做过,没经验啊
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木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-24 14:12:41
半导体制冷效率很低,而且容易坏。很多PCR仪器就是因为做连接把半导体制冷片烧坏而不能用的。不建议用PCR仪做低温连接反应。没有低温水浴,用的小泡沫箱做16度水浴密封好放4度冰箱还好些。
为什么
3楼2012-09-24 11:28:31
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查看全部 10 个回答

foxcl

铁虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-24 14:12:34
我是设16度,30min,24个循环,总12个小时。
2楼2012-09-24 11:16:23
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小河弯弯07

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
scelab: 金币+2, 这也行?!载体和片段分别多大? 2012-09-24 14:21:20
做连接不用那么长吧?我都是16度2小时啊~
载体pMD18T,片段500-700bp

[ Last edited by 小河弯弯07 on 2012-9-24 at 15:50 ]
4楼2012-09-24 14:04:49
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 金币+3, 鼓励新虫发帖交流,欢迎道生物医药区 2012-09-24 21:33:26
可以设定为16度99小时,第二天来了终止程序就可以了。PCR仪一直开着没什么问题。要注意的是一般PCR仪为了防止程序过程中溶液蒸发,是从顶部加热的,预设温度一般是超过100度的。如果做链接,最好不要这么高,如果是可以调的话,弄个室温就行了。
5楼2012-09-24 15:35:35
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