应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 粗提的DNA量太少，pcr都出不来产物，怎样能浓缩一下呢？
91/1返回列表
查看: 2462  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zh6yan

新虫 (初入文坛)

[求助] 粗提的DNA量太少，pcr都出不来产物，怎样能浓缩一下呢？ 已有3人参与

粗提的DNA量太少，pcr都出不来产物，怎样能浓缩一下呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-10-21 16:16:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-22 13:38:02
如果是DNA浓缩，可以加1/10体积的3M醋酸钠和两倍体积乙醇沉淀，75%乙醇洗涤，风干后用合适体积无菌水或者TE重新溶解到需要的浓度。
不过PCR所需的DNA模板量只需要很少很少，一般提取的DNA都要稀释后才能做PCR，你确定你PCR不成功是模板浓度不够的原因？
赞一下 回复此楼
2楼2012-10-21 16:42:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR只需ng级的DNA就可以了，而一般提DNA的浓度是ug/ul级别的。P不出来的原因很多，不一定是模板量不足引起的。你所说的量太少是多少，是否做了定量？
赞一下 回复此楼
3楼2012-10-22 00:35:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beishui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
提去的DNA，你稀释一下，做个梯度，之后拿去PCR，一般情况下是可以PCR出来的，一般粗提的DNA是不用浓缩的。
赞一下 回复此楼
宠辱不惊，看庭前花开花落；去留无意，望天上云卷云舒。
4楼2012-10-22 08:46:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wu_shiyong

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你测过浓度吗？你确定是浓度低扩增不出东西吗？PCR只需要很少的模板就能扩增出来的!
赞一下 回复此楼
低调稳重务实内敛---------------残
5楼2012-10-22 09:52:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

吃瓜的半仙

新虫 (小有名气)
浓缩dna，可以使用BIODAI或者QIAGEN 的盒子的，可以直接浓缩，进行后续pcr实验，效果上还是可以的，比较便捷。
赞一下 回复此楼
6楼2019-05-20 15:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

你是路人甲

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

PEG沉淀用的最多了，但是我个人觉得没有BIOG便捷，PEG-8000浓缩法：1. 5X PEG8000+NaCl配制 称取NaCl 8.766 g; PEG8000 50g溶解在200ml Milli-Q纯水中；121摄氏度 30min 湿热灭绝 30min；保存在4℃。2. 滤头过滤慢病毒上清液；3. 每30ml过滤后的病毒初始液，加入5X PEG-8000+NaCl母液7.5 ml；4. 每20～30min混合一次，共进行3-5次；5. 4度放置过夜；6. 4度，4000 g，离心 20min；7. 吸弃上清，静置管子1～2分钟，吸走残余液体；8. 加入适量的慢病毒溶解液溶解慢病毒沉淀；9. 集中后的病毒悬液分装成50 μl每份，保存在成品管中。用碎干冰速冻后储存在-80 ℃
赞一下 回复此楼
7楼2020-03-11 13:56:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

加乙醇过一次柱子就好
赞一下 回复此楼
核酸提取与Taqman诊断
8楼2020-03-12 09:19:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小乌贼

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

就是磨磨叶子，酒精沉淀一下扩pcr也能扩出来，扩不出条带原因很多，要不拿别人已知能扩的模板检验一下你的引物操作等等，正常提DNA浓度很高的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2020-03-12 12:48:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zh6yan 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂 +8 调剂的考研学生 2026-03-09 8/400 2026-03-15 22:14 by Winj1e
[考研] 化学工程321分求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-15 18:49 by a不易
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +7 秋有木北 2026-03-14 7/350 2026-03-15 17:30 by 小物理化学
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 化学工程321分求调剂（南京工业，浙江工业） +3 大米饭！ 2026-03-09 4/200 2026-03-14 02:34 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +3 归零lbm 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:20 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:57 by JourneyLucky
[考研] 考研材料与化工，求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:14 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +5 牛乳糖的卡卡 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:05 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 材料调剂，307分 +13 张泳铭1 2026-03-09 17/850 2026-03-13 11:09 by 薛云鹏
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 纺织、生物、化学、材料相关专业招生了 +4 耶耶业 2026-03-09 7/350 2026-03-12 19:05 by Equinoxhua
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +10 dream…… 2026-03-10 12/600 2026-03-12 13:46 by dream……
[考研] 293求调剂，一志愿陕师大生物学 +3 ??????.?.??? 2026-03-09 3/150 2026-03-11 10:02 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +3 三dd. 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:45 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭