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zh6yan

新虫 (初入文坛)

[求助] 粗提的DNA量太少,pcr都出不来产物,怎样能浓缩一下呢? 已有3人参与

粗提的DNA量太少,pcr都出不来产物,怎样能浓缩一下呢?
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小小乌贼

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

就是磨磨叶子,酒精沉淀一下扩pcr也能扩出来,扩不出条带原因很多,要不拿别人已知能扩的模板检验一下你的引物操作等等,正常提DNA浓度很高的

发自小木虫Android客户端
9楼2020-03-12 12:48:45
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查看全部 9 个回答

hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-22 13:38:02
如果是DNA浓缩,可以加1/10体积的3M醋酸钠和两倍体积乙醇沉淀,75%乙醇洗涤,风干后用合适体积无菌水或者TE重新溶解到需要的浓度。
不过PCR所需的DNA模板量只需要很少很少,一般提取的DNA都要稀释后才能做PCR,你确定你PCR不成功是模板浓度不够的原因?
2楼2012-10-21 16:42:05
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR只需ng级的DNA就可以了,而一般提DNA的浓度是ug/ul级别的。P不出来的原因很多,不一定是模板量不足引起的。你所说的量太少是多少,是否做了定量?
3楼2012-10-22 00:35:04
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beishui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
提去的DNA,你稀释一下,做个梯度,之后拿去PCR,一般情况下是可以PCR出来的,一般粗提的DNA是不用浓缩的。
宠辱不惊,看庭前花开花落;去留无意,望天上云卷云舒。
4楼2012-10-22 08:46:05
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