应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助~RACE扩增不出目的条带
121/2返回列表12下一页
查看: 2394  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yspain

新虫 (小有名气)

[求助] 求助~RACE扩增不出目的条带


求助。有一个基因5' 和3' 的目的条带分别是300BP和1000BP左右。但扩出来的条带都不是。设计好几次引物了（引物没问题），都扩不出来。其他基因也是用的相同的试剂盒和方法做的，都得到了目的条带，且测序结果也正确。
求助各位大侠，帮忙出个主意。谢谢啦~！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-03 21:24:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小城大宝

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跑巢式引物试试 巢式条带可信度还是很高的
赞一下 回复此楼
用你的笑容去改变这个世界，别让这个世界改变了你的笑容。
2楼2013-01-04 09:24:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
检查目标基因是否有形成超结构的趋势
赞一下 回复此楼
shine
3楼2013-01-04 15:47:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yspain

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小城大宝 at 2013-01-04 09:24:46
跑巢式引物试试 巢式条带可信度还是很高的

巢式引物？以前没大做过呢。现在跑出来的条带，拿去测序，得到的结果BLAST 不是我要的基因呢
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-04 16:29:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yspain

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-04 15:47:22
检查目标基因是否有形成超结构的趋势

初次做这些实验，不大懂，见笑了！忘指教！万分感谢啊！
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-04 16:31:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小城大宝

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yspain at 2013-01-04 16:29:54
巢式引物？以前没大做过呢。现在跑出来的条带，拿去测序，得到的结果BLAST 不是我要的基因呢...

巢式引物 就是以已经跑出的PCR产物为模板 再设计一条引物 在已经跑出这个长度范围内的 再跑PCR 如果依然有条带 那么是你目的条带的概率很大 如果不是你的目的条带 巢式PCR没有条带出现
赞一下 回复此楼
用你的笑容去改变这个世界，别让这个世界改变了你的笑容。
6楼2013-01-07 09:31:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuping880315

木虫 (著名写手)

折翼的天使

【答案】应助回帖

可能是模板的原因
我也遇到这个问题了
我上个月已经扩出来了
但是现在模板用完了换其他模板却扩不出来了
同一个基因
赞一下 回复此楼
生命中多少次的挫折才能成就一次伟大！
7楼2013-01-07 11:13:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuping880315

木虫 (著名写手)

折翼的天使
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小城大宝 at 2013-01-07 09:31:33
巢式引物 就是以已经跑出的PCR产物为模板 再设计一条引物 在已经跑出这个长度范围内的 再跑PCR 如果依然有条带 那么是你目的条带的概率很大 如果不是你的目的条带 巢式PCR没有条带出现...

有时我的巢氏跑完还有三四条带  很搞人人吧  我甚至想设计第三轮了 搞得我
赞一下 回复此楼
生命中多少次的挫折才能成就一次伟大！
8楼2013-01-07 11:50:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

race的质量一个是看反转后cDNA的质量，还有一个就是引物的好坏。
试剂盒的选择也很重要

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
9楼2013-01-08 12:17:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张翕婷

新虫 (初入文坛)
请问大鼠那一块组织PAR-1表达明显？
赞一下 回复此楼
10楼2013-01-08 12:50:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yspain 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 0703化学求调剂 +5 很老实人 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:57 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[考研] 0703求调剂 +7 jtyq001 2026-03-10 7/350 2026-03-14 01:06 by JourneyLucky
[考研] b区环境工程求调剂 +4 Maps1 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:23 by JourneyLucky
[考研] 26考研调剂 +3 ying123. 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:18 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 工科，求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] （081700）化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂（085602一志愿985） +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考研] 08食品或轻工求调剂，本科发表3篇sci一区top论文，一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵， 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭