应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助~RACE扩增不出目的条带
121/2返回列表12下一页
查看: 2743  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yspain

新虫 (小有名气)

[求助] 求助~RACE扩增不出目的条带


求助。有一个基因5' 和3' 的目的条带分别是300BP和1000BP左右。但扩出来的条带都不是。设计好几次引物了（引物没问题），都扩不出来。其他基因也是用的相同的试剂盒和方法做的，都得到了目的条带，且测序结果也正确。
求助各位大侠，帮忙出个主意。谢谢啦~！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-03 21:24:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小城大宝

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跑巢式引物试试 巢式条带可信度还是很高的
赞一下 回复此楼
用你的笑容去改变这个世界，别让这个世界改变了你的笑容。
2楼2013-01-04 09:24:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
检查目标基因是否有形成超结构的趋势
赞一下 回复此楼
shine
3楼2013-01-04 15:47:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yspain

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小城大宝 at 2013-01-04 09:24:46
跑巢式引物试试 巢式条带可信度还是很高的

巢式引物？以前没大做过呢。现在跑出来的条带，拿去测序，得到的结果BLAST 不是我要的基因呢
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-04 16:29:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yspain

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-04 15:47:22
检查目标基因是否有形成超结构的趋势

初次做这些实验，不大懂，见笑了！忘指教！万分感谢啊！
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-04 16:31:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小城大宝

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yspain at 2013-01-04 16:29:54
巢式引物？以前没大做过呢。现在跑出来的条带，拿去测序，得到的结果BLAST 不是我要的基因呢...

巢式引物 就是以已经跑出的PCR产物为模板 再设计一条引物 在已经跑出这个长度范围内的 再跑PCR 如果依然有条带 那么是你目的条带的概率很大 如果不是你的目的条带 巢式PCR没有条带出现
赞一下 回复此楼
用你的笑容去改变这个世界，别让这个世界改变了你的笑容。
6楼2013-01-07 09:31:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuping880315

木虫 (著名写手)

折翼的天使

【答案】应助回帖

可能是模板的原因
我也遇到这个问题了
我上个月已经扩出来了
但是现在模板用完了换其他模板却扩不出来了
同一个基因
赞一下 回复此楼
生命中多少次的挫折才能成就一次伟大！
7楼2013-01-07 11:13:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuping880315

木虫 (著名写手)

折翼的天使
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小城大宝 at 2013-01-07 09:31:33
巢式引物 就是以已经跑出的PCR产物为模板 再设计一条引物 在已经跑出这个长度范围内的 再跑PCR 如果依然有条带 那么是你目的条带的概率很大 如果不是你的目的条带 巢式PCR没有条带出现...

有时我的巢氏跑完还有三四条带  很搞人人吧  我甚至想设计第三轮了 搞得我
赞一下 回复此楼
生命中多少次的挫折才能成就一次伟大！
8楼2013-01-07 11:50:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

race的质量一个是看反转后cDNA的质量，还有一个就是引物的好坏。
试剂盒的选择也很重要

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
9楼2013-01-08 12:17:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张翕婷

新虫 (初入文坛)
请问大鼠那一块组织PAR-1表达明显？
赞一下 回复此楼
10楼2013-01-08 12:50:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yspain 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 wsYGJnURYvm6 2026-08-31 3/150 2026-09-01 01:52 by o3EMxHUAQDtS
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 4/200 2026-09-01 01:30 by o3EMxHUAQDtS
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 4/200 2026-09-01 01:30 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:23 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭