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Jianxiao_H金虫 (正式写手)
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怎么做实时定量pcr？
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吐槽一句：学姐什么都不懂！！  现在有某昆虫的转录组测序结果，也筛选出功能基因了。 想做定量pcr，比较功能基因在该昆虫不同龄期的表达规律。 该怎么开始？ 序列有有多，我要从哪里开始试剂引物？ 选TaqMan荧光探针还是SYBR荧光染料？如果用探针是不是还要设计探针啊？ 选什么做内参基因？应该是要选一个在不同年龄阶段均表达稳定的基因吧。18S rRNA可以么？ 还有能不能给我解释一下，外标法和外参法有什么区别、内标法，内参等等这些易混淆的概念。 谢谢。  |
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