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随风飘摇11

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[求助] 定量PCR跑出来没有CT值，怎么回事已有4人参与

跑了两个样做标准曲线，跑完结果第一个样就没有检测到CT值，怎么回事？两个样品就引物不一样，其他都一样啊。刚接触定量PCR，求教

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天道酬勤

1楼 2015-05-03 13:38:08

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晞朔

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
随风飘摇11: 金币+2, ★有帮助 2015-05-03 18:13:24

首先你要确认你的这对引物是否适合在你这个反映程序中扩增，可用凝胶电泳检测引物的特异性、退火温度等等。如果引物合适，再确认这个探针是否在所测样品中有表达，如果本身就没有表达或者表达量极低，也是无法检测的。祝好运。

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2楼2015-05-03 15:53:10

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随风飘摇11

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-03 15:53:10
首先你要确认你的这对引物是否适合在你这个反映程序中扩增，可用凝胶电泳检测引物的特异性、退火温度等等。如果引物合适，再确认这个探针是否在所测样品中有表达，如果本身就没有表达或者表达量极低，也是无法检测的 ...

怎么检测引物是否合适？定量的引物也可能用来做普通的PCR扩增吗？

[ 发自小木虫客户端 ]

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天道酬勤

3楼2015-05-03 18:13:10

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