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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 没有内参基因，还能做RT-PCR吗
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fannyyang

铁虫 (小有名气)

[交流] 没有内参基因，还能做RT-PCR吗 已有5人参与

本人做的物种没有内参基因，怎么办啊？ 是不是就不能做相对定量了
  
只能克隆内参基因了吗？ 还是做RT-PCR 的绝对定量啊
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1楼 2014-01-11 20:33:50
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-11 23:33:20
没有内参基因你就没有与你目的基因比较的参照了，那相对定量肯定做不了了。绝对定量更不用考虑了。你查查文献有没有做过的。
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hehe
2楼2014-01-11 21:13:50
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yyshpy007

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-12 18:52:37
本帖内容被屏蔽
3楼2014-01-11 23:40:22
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fannyyang

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yyshpy007 at 2014-01-11 23:40:22
绝对定量好像见得好少，没有内參基因确实没办法定量，不过很多内參基因保守行好，楼主不如做同源比对证实下这个物种的内參，以便后续研究也方便啊

同源比对了近缘物种的内参，比对了GAPDH这个内参，相似度挺高的，95% 是不是只能克隆了
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4楼2014-01-12 12:15:49
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
很多生物公司都有现成的内参引物，已经是10uM,不用设计也不用合成直接购买就可以用了
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rainwater
5楼2014-01-15 10:41:22
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冷眼倦天涯

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
还是用内参比较好啊，如果 没有对话怎么对比呢？相互之间好像不好看吧
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6楼2014-01-15 11:02:22
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fannyyang

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zhangyunjing at 2014-01-15 10:41:22
很多生物公司都有现成的内参引物，已经是10uM,不用设计也不用合成直接购买就可以用了

不是这个物种的也能用吗？
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7楼2014-01-17 15:08:19
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
生工的内参引物目前有三个物种，人类、大鼠和小鼠，如果没有你需要的物种的话可以让生工引物设计人员帮你设计，免费设计
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rainwater
8楼2014-01-21 10:57:49
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深蓝憧憬

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
从网上搜一个内参就是了
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9楼2014-01-21 13:53:12
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