应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 最近RT-PCR能够出来内参，却没有目的条带，请各位高手帮忙
101/1返回列表
查看: 2188  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 最近RT-PCR能够出来内参，却没有目的条带，请各位高手帮忙

各位好，我最近做RT-PCR，在一个月前做的时候我还能将目的基因和内参都扩增出来，但是现在又新提取RNA，做RT-PCR，结果没有目的条带，内参可以看见，跑胶的时候，在目的基因泳道只是在能看到引物二聚体！！！我的引物是使用一个月之前的，一直没有换新的，我想问一下各位，出现这种原因是什么情况！！？？？谢谢大家！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-14 15:05:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原因可能是你现在稀释的引物有问题了，我也遇见过这样的问题，建议你重新稀释引物试一试
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-14 15:23:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-09-14 15:23:44
原因可能是你现在稀释的引物有问题了，我也遇见过这样的问题，建议你重新稀释引物试一试

还要问一下，稀释好的引物需不需要分装一下，这样子可以避免反复冻融，我想用DEPC处理过的离心管分装，这样子可以吧？
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-16 08:34:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-09-14 15:23:44
原因可能是你现在稀释的引物有问题了，我也遇见过这样的问题，建议你重新稀释引物试一试

一般引物设计不是有4对嘛，稀释的引物一般就是一管，4度保存，不存在反复冻存呀
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-18 09:46:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-09-18 09:46:14
一般引物设计不是有4对嘛，稀释的引物一般就是一管，4度保存，不存在反复冻存呀...

呀，我们都是用完一次直接放在了-20里面了，呵呵
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-18 13:02:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-09-18 09:46:14
一般引物设计不是有4对嘛，稀释的引物一般就是一管，4度保存，不存在反复冻存呀...

呵呵，每个实验室都有自己的方法嘛，反正我们是放在4度冰箱的，这样做也没问题。
赞一下 回复此楼
6楼2012-09-18 15:16:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-09-18 15:16:50
呵呵，每个实验室都有自己的方法嘛，反正我们是放在4度冰箱的，这样做也没问题。...

呵呵 对的  ，我想问一下你们做核酸电泳的时候常用的是什么核酸染料，是EB，Goldenview，还是别的？？谢谢！
赞一下 回复此楼
7楼2012-09-18 20:40:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yq19880610

新虫 (初入文坛)
我也遇到同样的问题那 明天重新换对引物试试 关注中~
赞一下 回复此楼
8楼2013-04-15 19:02:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yq19880610 at 2013-04-15 19:02:48
我也遇到同样的问题那 明天重新换对引物试试 关注中~

后来检测引物没有问题，注意RNA提取和RT这一步就很重要了
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2013-04-17 08:01:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoyangren7

金虫 (小有名气)
引物10pm放在-20可以用很久
赞一下 回复此楼
10楼2013-04-17 09:23:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 czcpudai 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 我面上完蛋了 +8 且听虎啸 2026-08-20 9/450 2026-08-24 13:52 by zzuzxg
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 18/900 2026-08-24 12:03 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +12 kulium 2026-08-21 15/750 2026-08-24 12:02 by iaeyuan
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 科研孤儿太难了 +18 我4大白菜 2026-08-20 19/950 2026-08-24 09:47 by 凯恩广盛催化分�
[基金申请] 明天应该可查了！？ +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭