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汕头大学海洋科学接受调剂
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 最近RT-PCR能够出来内参,却没有目的条带,请各位高手帮忙

各位好,我最近做RT-PCR,在一个月前做的时候我还能将目的基因和内参都扩增出来,但是现在又新提取RNA,做RT-PCR,结果没有目的条带,内参可以看见,跑胶的时候,在目的基因泳道只是在能看到引物二聚体!!!我的引物是使用一个月之前的,一直没有换新的,我想问一下各位,出现这种原因是什么情况!!???谢谢大家!
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by yq19880610 at 2013-04-15 19:02:48
我也遇到同样的问题那 明天重新换对引物试试 关注中~

后来检测引物没有问题,注意RNA提取和RT这一步就很重要了
9楼2013-04-17 08:01:45
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xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
原因可能是你现在稀释的引物有问题了,我也遇见过这样的问题,建议你重新稀释引物试一试
2楼2012-09-14 15:23:44
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-09-14 15:23:44
原因可能是你现在稀释的引物有问题了,我也遇见过这样的问题,建议你重新稀释引物试一试

还要问一下,稀释好的引物需不需要分装一下,这样子可以避免反复冻融,我想用DEPC处理过的离心管分装,这样子可以吧?
3楼2012-09-16 08:34:42
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xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-09-14 15:23:44
原因可能是你现在稀释的引物有问题了,我也遇见过这样的问题,建议你重新稀释引物试一试

一般引物设计不是有4对嘛,稀释的引物一般就是一管,4度保存,不存在反复冻存呀
4楼2012-09-18 09:46:14
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