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980979990

新虫 (小有名气)

[求助] 求助,Non-coding RNA量怎么检测,普通的pcr能检测到吗?

老板最近迷上了一段non-coding RNA让我做这段序列表达量的检测,不知道是应该把它逆转录了再检测还是直接提了RNA做检测,但是怕操作慢了检测不见了,求各位指点指点
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-09-08 20:06:11
980979990: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-09-11 08:21:40
如果你的ncRNA序列是mRNA的一部分,只能用northern检测。如果你做的ncRNA不是mRNA的一部分,还可以用rt-PCR检测。
2楼2013-09-08 01:14:00
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980979990

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-08 01:14:00
如果你的ncRNA序列是mRNA的一部分,只能用northern检测。如果你做的ncRNA不是mRNA的一部分,还可以用rt-PCR检测。

不是mrna的一部分,直接用random引物做rt-pcr能p出条带吗,不知道你做的结果怎么样
3楼2013-09-11 13:01:02
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


wizardfan: 金币+1, 谢谢补充 2013-09-12 05:19:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by 980979990 at 2013-09-11 13:01:02
不是mrna的一部分,直接用random引物做rt-pcr能p出条带吗,不知道你做的结果怎么样...

可以用随机引物做RT。
4楼2013-09-12 00:43:59
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980979990

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-12 00:43:59
可以用随机引物做RT。...

昨天p过一次了,没有条带出现啊····
5楼2013-09-12 09:51:08
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 980979990 at 2013-09-12 09:51:08
昨天p过一次了,没有条带出现啊····...

反转录后的产物用其它引物P了没有?
6楼2013-09-12 10:23:04
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980979990

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-12 10:23:04
反转录后的产物用其它引物P了没有?...

就是用的随机引物做的逆转录DNA做的pcr,没有条带啊
7楼2013-09-12 13:50:58
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 980979990 at 2013-09-12 13:50:58
就是用的随机引物做的逆转录DNA做的pcr,没有条带啊...

你是说没P出目标片段,还是连证对照也没有?
8楼2013-09-13 00:33:33
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980979990

新虫 (小有名气)

送红花一朵
内参能p出来,可是我的目的条带木有哇
9楼2013-09-13 08:07:01
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xqlcjy

银虫 (小有名气)

可能引物有问题吧,或者你的ncRNA在提取的过程中损失了,或者看看你的ncRNA序列看是否可以用OligodT引物进行反转录
知足,知不足,不知足
10楼2013-09-13 13:42:16
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