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ngjy123

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】RNA浓度和质量检测 已有8人参与

大家有提取RNA的吗?请教大家都是用什么方法进行RNA浓度和质量检测的。谢谢了~~~
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smilefish06

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):是不是NaroDrop?呵呵,鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-14 14:21:48
以前提RNA,实验室有台仪器,可以直接测定核酸、蛋白的浓度和纯度,型号忘记了,仪器操作很简单,RNA提取好后稀释,吸取一微升,点到仪器盛样品的地方就可以了,仪器可以直接读出样品的260/280,还有浓度,每微升多少纳克都有,
也可以用分光光度计测定
做自己
2楼2011-01-14 11:08:23
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simiao8793

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-14 14:21:58
RNA的量可以直接用核酸定量仪检测,上样量1ul至2ul,或者用分光光度计分别测出OD260和OD280,一般需将RNA稀释一百倍左右检测。RNA的浓度=40*OD260,单位:ng/ul。
RNA的质量好坏可以看两个方面:1、OD260/280在1.8至2.0之间;
2、跑核酸电泳,观察条带是否有弥散,一般28S的条带亮度是18S的两倍
独孤圣仙!
3楼2011-01-14 12:32:24
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cjjsdau

木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
得看你那有什么仪器了,我这用的是紫外分光光度仪,稀释100倍或50倍,测OD230,OD260和OD280,看OD260/OD280的值
拜托,我的头像不是大苍蝇,这叫松阿扁叶峰
4楼2011-01-14 15:49:29
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ngjy123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by smilefish06 at 2011-01-14 11:08:23:
以前提RNA,实验室有台仪器,可以直接测定核酸、蛋白的浓度和纯度,型号忘记了,仪器操作很简单,RNA提取好后稀释,吸取一微升,点到仪器盛样品的地方就可以了,仪器可以直接读出样品的260/280,还有浓度,每微升多 ...

谢谢你!A260和A280都是负值,浓度也是负值是怎么回事啊?
5楼2011-01-14 16:24:22
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ngjy123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by simiao8793 at 2011-01-14 12:32:24:
RNA的量可以直接用核酸定量仪检测,上样量1ul至2ul,或者用分光光度计分别测出OD260和OD280,一般需将RNA稀释一百倍左右检测。RNA的浓度=40*OD260,单位:ng/ul。
RNA的质量好坏可以看两个方面:1、OD260/280在1 ...

非常感谢!出现负值是怎么回事呢?
6楼2011-01-14 16:25:07
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ngjy123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by ngjy123 at 2011-01-14 10:01:55:
大家有提取RNA的吗?请教大家都是用什么方法进行RNA浓度和质量检测的。谢谢了~~~

十分感谢!
7楼2011-01-14 16:25:44
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starseacow

专家顾问 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by ngjy123 at 2011-01-14 16:25:07:

非常感谢!出现负值是怎么回事呢?

这可能与你调零用的空白液有关,建议空白和溶解RNA全用TE
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
8楼2011-01-14 16:41:17
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smilefish06

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by ngjy123 at 2011-01-14 16:24:22:

谢谢你!A260和A280都是负值,浓度也是负值是怎么回事啊?

有一种可能是你提的RNA杂质太多,干扰了仪器吸光值,得到的值可能是负值
做自己
9楼2011-01-14 17:15:48
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stewart3261

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
295521楼: Originally posted by ngjy123 at 2011-01-14 16:24:22
谢谢你!A260和A280都是负值,浓度也是负值是怎么回事啊?...

你在测量吸光度时用的是玻璃比色皿吧?换用石英的比色皿吧!
10楼2012-07-19 15:25:24
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