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yqs129219

新虫 (小有名气)

[求助] 如何根据maker来确定RNA浓度

maker是每5ul的50ng和750bp100ng,例如RNA上样量1ul，用6x的loding buffer，这样电泳后和maker比较亮度，RNA3条带加起来的浓度是不是就是1ul稀释6倍的RNA浓度。
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1楼 2012-08-29 22:30:17
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四叶草_lin

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以用已知浓度的RNA和未知的一起跑，然后对比亮度也行。
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2楼2012-08-30 00:25:50
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王礼鹏

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-08-30 14:47:43
比如说三条带中一条带18s的亮度和MARKER中的750bp的亮度相同，那就说明你的1ulRNA样品中含有100ng的18s，（当然这是在你加了buffer后，要全部上样）。他对应的应该是质量，而不是溶度。楼上的方法也挺好的，对比下就ok了。祝实验顺利。。。。。。
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3楼2012-08-30 09:06:31
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yqs129219

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 王礼鹏 at 2012-08-30 09:06:31
比如说三条带中一条带18s的亮度和MARKER中的750bp的亮度相同，那就说明你的1ulRNA样品中含有100ng的18s，（当然这是在你加了buffer后，要全部上样）。他对应的应该是质量，而不是溶度。楼上的方法也挺好的，对比下就 ...

RNA浓度是3条带加起来的吧
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4楼2012-08-30 09:41:23
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你点样时要保证maker和样的体积是一样的，最好是maker要求的体积，如你说的5ul，电泳之后看你的条带和maker带的亮度比，这个是大概估计的，进行换算就可以得到大概浓度！
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持之以恒、永不放弃！
5楼2012-08-30 10:23:18
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主为什么用MARKER来确定RNA浓度呢？？用肉眼观察误差太大，只能粗略。
用NANODROP测一下就晓得浓度了啊。。。。。。
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6楼2012-08-30 13:13:30
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
LZ想要知道的是总RNA的浓度么？与MARKER比较只是粗略的估计下，最好还是测下浓度吧。
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共同学习，共同进步，共同提高，加油！
7楼2012-08-30 13:22:50
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