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yqs129219

新虫 (小有名气)

[求助] 如何根据maker来确定RNA浓度

maker是每5ul的50ng和750bp100ng,例如RNA上样量1ul,用6x的loding buffer,这样电泳后和maker比较亮度,RNA3条带加起来的浓度是不是就是1ul稀释6倍的RNA浓度。
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四叶草_lin

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以用已知浓度的RNA和未知的一起跑,然后对比亮度也行。
2楼2012-08-30 00:25:50
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王礼鹏

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-08-30 14:47:43
比如说三条带中一条带18s的亮度和MARKER中的750bp的亮度相同,那就说明你的1ulRNA样品中含有100ng的18s,(当然这是在你加了buffer后,要全部上样)。他对应的应该是质量,而不是溶度。楼上的方法也挺好的,对比下就ok了。祝实验顺利。。。。。。
3楼2012-08-30 09:06:31
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yqs129219

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 王礼鹏 at 2012-08-30 09:06:31
比如说三条带中一条带18s的亮度和MARKER中的750bp的亮度相同,那就说明你的1ulRNA样品中含有100ng的18s,(当然这是在你加了buffer后,要全部上样)。他对应的应该是质量,而不是溶度。楼上的方法也挺好的,对比下就 ...

RNA浓度是3条带加起来的吧
4楼2012-08-30 09:41:23
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你点样时要保证maker和样的体积是一样的,最好是maker要求的体积,如你说的5ul,电泳之后看你的条带和maker带的亮度比,这个是大概估计的,进行换算就可以得到大概浓度!
持之以恒、永不放弃!
5楼2012-08-30 10:23:18
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主为什么用MARKER来确定RNA浓度呢??用肉眼观察误差太大,只能粗略。
用NANODROP测一下就晓得浓度了啊。。。。。。
6楼2012-08-30 13:13:30
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
LZ想要知道的是总RNA的浓度么?与MARKER比较只是粗略的估计下,最好还是测下浓度吧。
共同学习,共同进步,共同提高,加油!
7楼2012-08-30 13:22:50
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