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yu112358yu

铜虫 (小有名气)

[求助] RNA浓度好低 适合做RT-PCR吗?

大家好 我用试剂盒提取的RNA浓度好低 测了下浓度 只有34ng/ul,纯度还好OD= 1.98.不知道这么低的浓度 是不适合做RTPCR。我用的是TAKARA的反转录试剂盒,他第一步10ul体系里面说的总RNA量不超过5ug,但是我的浓度也太低了,加8ul,也就250ng左右~不知道是不是和做RT,请指教~


[ Last edited by yu112358yu on 2011-8-28 at 14:52 ]
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

yu112358yu(金币+1): 谢谢 2011-08-29 16:02:57
不知道楼主的后续试验要做啥?确定有些低。。
jiayoubashaonian
2楼2011-08-28 16:04:30
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青菜小虫

银虫 (著名写手)

风居住的街道

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 小虫很活跃啊~ 2011-08-28 16:53:02
yu112358yu(金币+1): 谢谢 2011-08-29 16:03:10
TAKARA的反转录试剂盒,这个好贵我也用过。不过后来我买的transgen的比这个好用,还便宜。我的病毒RNA浓度也很低...都不能直接电泳检测,都是先反转录后才知道提RNA得情况,你可以试一下吧
生命即这般无尽变数,辗转来去皆苛求不得
3楼2011-08-28 16:33:11
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12zhangwei

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

yu112358yu(金币+1): 谢谢 2011-08-29 16:03:20
如果只是扩增基因,这点亮度足矣了,所以放心往下做就行了。不要担心
4楼2011-08-28 20:05:48
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linyanfei

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

yu112358yu(金币+1): 谢谢 2011-08-29 16:03:31
哎,我劝楼主还是重新提取RNA吧,毕竟就算用试剂盒提的话,也大概在20块钱左右一次,可是反转录可不一样了,我先看了一下反转录酶,贵的吓人,1ul就大概要20块钱呢!你自己还是掂量掂量吧,要是转录不成功,亏的可大发了!
5楼2011-08-28 20:07:34
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475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

yu112358yu(金币+1): 谢谢 2011-08-29 16:03:40
没问题,楼主放心用吧,这样的浓度已经可以了,我之前提取的浓度比你的还要低很多,有的根本就看不到三个条带,但是不影响的。放心
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
6楼2011-08-28 22:01:38
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weng1988

铜虫 (小有名气)

缺实有点浓度低,只不过有的话还是RT试试看,说不能就能P出你要的东西来呢。
寻找自己的未来。
7楼2012-05-01 14:49:13
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君子婷

银虫 (小有名气)

楼主好!我最近也打算提取RNA,请问怎样测已提取到的RNA浓度呀?谢谢哈!
再见,青春
8楼2012-07-03 17:22:19
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