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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA浓度好低 适合做RT-PCR吗？
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yu112358yu

铜虫 (小有名气)

[求助] RNA浓度好低 适合做RT-PCR吗？

大家好 我用试剂盒提取的RNA浓度好低 测了下浓度 只有34ng/ul，纯度还好OD= 1.98.不知道这么低的浓度 是不适合做RTPCR。我用的是TAKARA的反转录试剂盒，他第一步10ul体系里面说的总RNA量不超过5ug，但是我的浓度也太低了，加8ul，也就250ng左右～不知道是不是和做RT，请指教～


[ Last edited by yu112358yu on 2011-8-28 at 14:52 ]
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1楼 2011-08-28 14:50:39
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

yu112358yu(金币+1): 谢谢 2011-08-29 16:02:57
不知道楼主的后续试验要做啥？确定有些低。。
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jiayoubashaonian
2楼2011-08-28 16:04:30
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青菜小虫

银虫 (著名写手)

风居住的街道

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 小虫很活跃啊~ 2011-08-28 16:53:02
yu112358yu(金币+1): 谢谢 2011-08-29 16:03:10
TAKARA的反转录试剂盒，这个好贵我也用过。不过后来我买的transgen的比这个好用，还便宜。我的病毒RNA浓度也很低...都不能直接电泳检测，都是先反转录后才知道提RNA得情况，你可以试一下吧
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生命即这般无尽变数，辗转来去皆苛求不得
3楼2011-08-28 16:33:11
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12zhangwei

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

yu112358yu(金币+1): 谢谢 2011-08-29 16:03:20
如果只是扩增基因，这点亮度足矣了，所以放心往下做就行了。不要担心
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4楼2011-08-28 20:05:48
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linyanfei

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

yu112358yu(金币+1): 谢谢 2011-08-29 16:03:31
哎，我劝楼主还是重新提取RNA吧，毕竟就算用试剂盒提的话，也大概在20块钱左右一次，可是反转录可不一样了，我先看了一下反转录酶，贵的吓人，1ul就大概要20块钱呢！你自己还是掂量掂量吧，要是转录不成功，亏的可大发了！
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5楼2011-08-28 20:07:34
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475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

yu112358yu(金币+1): 谢谢 2011-08-29 16:03:40
没问题，楼主放心用吧，这样的浓度已经可以了，我之前提取的浓度比你的还要低很多，有的根本就看不到三个条带，但是不影响的。放心
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
6楼2011-08-28 22:01:38
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weng1988

铜虫 (小有名气)
缺实有点浓度低，只不过有的话还是RT试试看，说不能就能P出你要的东西来呢。
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寻找自己的未来。
7楼2012-05-01 14:49:13
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君子婷

银虫 (小有名气)
楼主好！我最近也打算提取RNA，请问怎样测已提取到的RNA浓度呀？谢谢哈！
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再见，青春
8楼2012-07-03 17:22:19
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