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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » trizol提取副溶RNA RT-PCR
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大钉子

新虫 (初入文坛)

[交流] trizol提取副溶RNA RT-PCR 已有3人参与

用trizol法提的RNA，把酚当成酚氯仿用了，尽然提出了RNA而且纯度还不错，这是为啥啊？
还有做RT的是时候为啥先要反转录啊？
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1楼 2011-08-12 13:07:39
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)
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西瓜(金币+1): 同意！ 2011-08-12 18:18:58
你的酚起到了和氯仿一样的作用，把蛋白抽提掉了。
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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
2楼2011-08-12 14:29:45
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
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1楼: Originally posted by 大钉子 at 2011-08-12 13:07:39:
用trizol法提的RNA，把酚当成酚氯仿用了，尽然提出了RNA而且纯度还不错，这是为啥啊？
还有做RT的是时候为啥先要反转录啊？

您能给我解释一下啊RT是神马意思吗，让我学习一下！
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
3楼2011-08-12 14:30:55
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)
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西瓜(金币+1): 鼓励 2011-08-12 18:19:25
你RT就是反转录的缩写，不知道你说的什么意思？RNA不反转录为cDNA，当然没办法进行其他实验喽。
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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
4楼2011-08-12 14:36:14
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大钉子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 空谷幽风 at 2011-08-12 14:30:55:
您能给我解释一下啊RT是神马意思吗，让我学习一下！

RT-PCR不是real time pcr？我二了。。。

[ Last edited by 大钉子 on 2011-8-12 at 19:34 ]
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5楼2011-08-12 19:27:13
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大钉子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-08-12 14:36:14:
你RT就是反转录的缩写，不知道你说的什么意思？RNA不反转录为cDNA，当然没办法进行其他实验喽。

我想知道为啥做rt-pcr的时候不能直接用rna而要把rna反转录成cdna才做
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6楼2011-08-12 19:28:08
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 大钉子 at 2011-08-12 19:27:13:
RT-PCR不是real time pcr？我二了。。。
[ Last edited by 大钉子 on 2011-8-12 at 19:34 ]

你真的二了
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
7楼2011-08-12 20:57:34
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)
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引用回帖:
5楼: Originally posted by 大钉子 at 2011-08-12 19:27:13:
RT-PCR不是real time pcr？我二了。。。
[ Last edited by 大钉子 on 2011-8-12 at 19:34 ]

realtimePCR也有用rtPCR说的，不过现在都缩写为qPCR。
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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
8楼2011-08-12 21:42:00
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)
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6楼: Originally posted by 大钉子 at 2011-08-12 19:28:08:
我想知道为啥做rt-pcr的时候不能直接用rna而要把rna反转录成cdna才做

这样，你好好找本分子生物学的书看看。主要是因为Taq酶只能以DNA为模板，进行扩增，以RNA为模板的转录，只能用特殊的反转录酶才行。
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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
9楼2011-08-12 21:44:26
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
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为了避免混淆，现在约定俗成的是，RT-PCR特指反转录PCR，荧光定量PCR（real-time PCR）的缩写用qPCR（quantitative PCR）。如果是先反转录得到cDNA，再做qPCR，这种结合了反转录的荧光定量PCR技术缩写成qRT-PCR。
详见维基百科：http://en.wikipedia.org/wiki/Real-time_polymerase_chain_reaction
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10楼2011-08-13 00:44:00
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