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大钉子

新虫 (初入文坛)

[交流] trizol提取副溶RNA RT-PCR已有3人参与

用trizol法提的RNA,把酚当成酚氯仿用了,尽然提出了RNA而且纯度还不错,这是为啥啊?
还有做RT的是时候为啥先要反转录啊?
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

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西瓜(金币+1): 同意! 2011-08-12 18:18:58
你的酚起到了和氯仿一样的作用,把蛋白抽提掉了。
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
2楼2011-08-12 14:29:45
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空谷幽风

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1楼: Originally posted by 大钉子 at 2011-08-12 13:07:39:
用trizol法提的RNA,把酚当成酚氯仿用了,尽然提出了RNA而且纯度还不错,这是为啥啊?
还有做RT的是时候为啥先要反转录啊?

您能给我解释一下啊RT是神马意思吗,让我学习一下!
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
3楼2011-08-12 14:30:55
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

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西瓜(金币+1): 鼓励 2011-08-12 18:19:25
你RT就是反转录的缩写,不知道你说的什么意思?RNA不反转录为cDNA,当然没办法进行其他实验喽。
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
4楼2011-08-12 14:36:14
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大钉子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 空谷幽风 at 2011-08-12 14:30:55:
您能给我解释一下啊RT是神马意思吗,让我学习一下!

RT-PCR不是real time pcr?我二了。。。

[ Last edited by 大钉子 on 2011-8-12 at 19:34 ]
5楼2011-08-12 19:27:13
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大钉子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-08-12 14:36:14:
你RT就是反转录的缩写,不知道你说的什么意思?RNA不反转录为cDNA,当然没办法进行其他实验喽。

我想知道为啥做rt-pcr的时候不能直接用rna而要把rna反转录成cdna才做
6楼2011-08-12 19:28:08
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 大钉子 at 2011-08-12 19:27:13:
RT-PCR不是real time pcr?我二了。。。
[ Last edited by 大钉子 on 2011-8-12 at 19:34 ]

你真的二了
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
7楼2011-08-12 20:57:34
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)


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引用回帖:
5楼: Originally posted by 大钉子 at 2011-08-12 19:27:13:
RT-PCR不是real time pcr?我二了。。。
[ Last edited by 大钉子 on 2011-8-12 at 19:34 ]

realtimePCR也有用rtPCR说的,不过现在都缩写为qPCR。
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
8楼2011-08-12 21:42:00
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
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6楼: Originally posted by 大钉子 at 2011-08-12 19:28:08:
我想知道为啥做rt-pcr的时候不能直接用rna而要把rna反转录成cdna才做

这样,你好好找本分子生物学的书看看。主要是因为Taq酶只能以DNA为模板,进行扩增,以RNA为模板的转录,只能用特殊的反转录酶才行。
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
9楼2011-08-12 21:44:26
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
为了避免混淆,现在约定俗成的是,RT-PCR特指反转录PCR,荧光定量PCR(real-time PCR)的缩写用qPCR(quantitative PCR)。如果是先反转录得到cDNA,再做qPCR,这种结合了反转录的荧光定量PCR技术缩写成qRT-PCR。
详见维基百科:http://en.wikipedia.org/wiki/Real-time_polymerase_chain_reaction
10楼2011-08-13 00:44:00
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