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biofeixue

木虫 (著名写手)

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[求助] RNA提取时超净工作台的应用等？

　　我提的是拟南芥叶的总RNA，在液氮研磨和加TRizol都是在外面做的，加入Trizol后都在工作台里做，且一直吹风，因一直提的RNA不好，特向大家请教注意事项。
　　我取0.1g拟南芥叶，加1　ml　trizol, 后面氯仿每1ml　trizol加了400微升，混匀离心后取了分三次取了0.48 ml，后又加了400微升氯仿，混匀离心后取了分两次取了0.３ ml，再加0.3 ml异丙醇，－２０度沉淀了1至２小时。
　　请问以上步骤又有哪些问题。
　　我提的RNA　OD260/280较低。
　　谢谢各位了！！！

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1楼 2011-05-31 15:37:39

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churchill87426

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-06-02 20:21:28
biofeixue(金币+2): 2011-06-06 05:51:08
biofeixue(金币+2): 2011-06-06 06:16:34

我的液氮研磨和TRIzol都是在超净台做的，而且不吹风，吹风会有空气流通，易带入RNA酶使RNA降解。而且研磨用的器材区要高温处理，我是把研钵等250度4小时以上。

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2楼2011-06-02 20:06:00

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beautybanana

木虫 (著名写手)

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西瓜(金币+3): 欢迎应助 2011-06-02 23:00:13
biofeixue(金币+5): 2011-06-06 06:16:49

引用回帖:

Originally posted by biofeixue at 2011-05-31 15:37:39:
　　我提的是拟南芥叶的总RNA，在液氮研磨和加TRizol都是在外面做的，加入Trizol后都在工作台里做，且一直吹风，因一直提的RNA不好，特向大家请教注意事项。
　　我取0.1g拟南芥叶，加1　ml　trizol, 后面氯仿每 ...

仔细看试剂盒说明书的操作步骤，给你下载一个takara的植物RNA提取试剂盒的说明书参看下~

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3楼2011-06-02 20:45:16

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