24小时热门版块排行榜    

查看: 4087  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

biofeixue

木虫 (著名写手)

[求助] RNA提取时超净工作台的应用等?

  我提的是拟南芥叶的总RNA,在液氮研磨和加TRizol都是在外面做的,加入Trizol后都在工作台里做,且一直吹风,因一直提的RNA不好,特向大家请教注意事项。
  我取0.1g拟南芥叶,加1 ml trizol, 后面氯仿每1ml trizol加了400微升,混匀离心后取了分三次取了0.48 ml,后又加了400微升氯仿,混匀离心后取了分两次取了0.3 ml,再加0.3 ml异丙醇,-20度沉淀了1至2小时。
  请问以上步骤又有哪些问题。
  我提的RNA OD260/280较低。
  谢谢各位了!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蝈_屯

新虫 (初入文坛)

不好意思,是最好不是最后。。。
8楼2011-06-26 22:07:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

churchill87426

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-06-02 20:21:28
biofeixue(金币+2): 2011-06-06 05:51:08
biofeixue(金币+2): 2011-06-06 06:16:34
我的液氮研磨和TRIzol都是在超净台做的,而且不吹风,吹风会有空气流通,易带入RNA酶使RNA降解。 而且研磨用的器材区要高温处理,我是把研钵等250度4小时以上。
2楼2011-06-02 20:06:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beautybanana

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 欢迎应助 2011-06-02 23:00:13
biofeixue(金币+5): 2011-06-06 06:16:49
引用回帖:
Originally posted by biofeixue at 2011-05-31 15:37:39:
  我提的是拟南芥叶的总RNA,在液氮研磨和加TRizol都是在外面做的,加入Trizol后都在工作台里做,且一直吹风,因一直提的RNA不好,特向大家请教注意事项。
  我取0.1g拟南芥叶,加1 ml trizol, 后面氯仿每 ...

仔细看试剂盒说明书的操作步骤,给你下载一个takara的植物RNA提取试剂盒的说明书参看下~
3楼2011-06-02 20:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

我全套都是在外面做的。找个人流少的角落就可以了,不用太担心。
OD260/OD280低,可能是污染了蛋白,估计是用氯仿抽提之后取上清时碰到了中间相。RNA要纯,量一般都够的,下次取上清时不要贪多啦。
4楼2011-06-02 23:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我不理解! +19 Edward_pc 2026-08-26 27/1350 2026-09-02 12:08 by Ai19911123
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 16/800 2026-09-02 12:07 by Ai19911123
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +4 瞬息宇宙 2026-09-01 8/400 2026-09-02 10:35 by 瞬息宇宙
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
信息提示
请填处理意见