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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】植物组织RNA提取求高人指点
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阿德54007

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】植物组织RNA提取求高人指点 已有4人参与

本人刚进实验室不久，老师让提取大豆和豆荚的RNA，大豆种子的好提取一些，但是像花生壳和豆荚这一类果皮含纤维素和其他杂志较多，而且用液氮很难研磨，提取效果不理想有时候根本就没结果，求路过的朋友指教一下，兄弟感激不尽
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阳光温热，岁月静好，你还没来，我怎敢老
1楼 2010-08-24 13:06:32
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hxq320

木虫 (正式写手)
用液氮研磨的时候可以加一些PVP，用CTAB法提取RNA效果一般会比较好些
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2楼2010-08-24 15:28:49
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阿德54007

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hxq320 at 2010-08-24 15:28:49:
用液氮研磨的时候可以加一些PVP，用CTAB法提取RNA效果一般会比较好些

液氮研磨的时候加PVP是防止褐化的，对于提取叶片等幼嫩组织的DNA或RNA比较有用，对于本实验估计作用不是很明显，但是想法很好，我可以尝试一下。
除了试剂盒还有什么其他好的方法或建议吗？
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阳光温热，岁月静好，你还没来，我怎敢老
3楼2010-08-25 20:36:56
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hxq320

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
目前提取RNA的方法比较多，CTAB法提取是比较好的，还有异硫氰酸胍法，sds法这些都是比较常用的方法，可以试一下，而且试剂也便宜
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4楼2010-08-25 21:14:15
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
★ ★ ★
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lstt09nk(金币+2):鼓励交流~~ 2010-08-26 09:12:28
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Originally posted by 阿德54007 at 2010-08-25 20:36:56:

液氮研磨的时候加PVP是防止褐化的，对于提取叶片等幼嫩组织的DNA或RNA比较有用，对于本实验估计作用不是很明显，但是想法很好，我可以尝试一下。
除了试剂盒还有什么其他好的方法或建议吗？

敢问褐化是个什么概念啊？还有我是提真菌RNA的，用invitrogen的盒子，那是个通用的，上面有说脂肪等物质含量太多的时候。我想你可以在液氮中先敲碎样品，这样使劲就能研好了。用invitrogen的trizol他提到离心后脂肪等物质会飘在最上层，到时候取走就可以了。
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5楼2010-08-25 21:18:51
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silicare

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★ ★
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lstt09nk(金币+1):鼓励，加油~~ 2010-08-26 09:12:14
引用回帖:
Originally posted by linxi8579 at 2010-08-25 21:18:51:

敢问褐化是个什么概念啊？还有我是提真菌RNA的，用invitrogen的盒子，那是个通用的，上面有说脂肪等物质含量太多的时候。我想你可以在液氮中先敲碎样品，这样使劲就能研好了。用invitrogen的trizol他提到离心后 ...

就是多糖多酚的影响，尤其是多酚被氧化后成为醌类可以和rna不可逆结合~
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6楼2010-08-26 08:43:07
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-08-26 08:43:07:


就是多糖多酚的影响，尤其是多酚被氧化后成为醌类可以和rna不可逆结合~

哦，thank you very much.
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7楼2010-08-27 08:53:54
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