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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RNA浓度和质量检测
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ngjy123

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】RNA浓度和质量检测已有8人参与

大家有提取RNA的吗？请教大家都是用什么方法进行RNA浓度和质量检测的。谢谢了~~~
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1楼2011-01-14 10:01:55
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smilefish06

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):是不是NaroDrop？呵呵，鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-14 14:21:48
以前提RNA，实验室有台仪器，可以直接测定核酸、蛋白的浓度和纯度，型号忘记了，仪器操作很简单，RNA提取好后稀释，吸取一微升，点到仪器盛样品的地方就可以了，仪器可以直接读出样品的260/280,还有浓度，每微升多少纳克都有，
也可以用分光光度计测定
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做自己
2楼2011-01-14 11:08:23
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simiao8793

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-14 14:21:58
RNA的量可以直接用核酸定量仪检测，上样量1ul至2ul，或者用分光光度计分别测出OD260和OD280，一般需将RNA稀释一百倍左右检测。RNA的浓度=40*OD260，单位：ng/ul。
RNA的质量好坏可以看两个方面：1、OD260/280在1.8至2.0之间；
2、跑核酸电泳，观察条带是否有弥散，一般28S的条带亮度是18S的两倍
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独孤圣仙！
3楼2011-01-14 12:32:24
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cjjsdau

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
得看你那有什么仪器了，我这用的是紫外分光光度仪，稀释100倍或50倍，测OD230，OD260和OD280，看OD260/OD280的值
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拜托，我的头像不是大苍蝇，这叫松阿扁叶峰
4楼2011-01-14 15:49:29
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ngjy123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by smilefish06 at 2011-01-14 11:08:23:
以前提RNA，实验室有台仪器，可以直接测定核酸、蛋白的浓度和纯度，型号忘记了，仪器操作很简单，RNA提取好后稀释，吸取一微升，点到仪器盛样品的地方就可以了，仪器可以直接读出样品的260/280,还有浓度，每微升多 ...

谢谢你！A260和A280都是负值，浓度也是负值是怎么回事啊？
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5楼2011-01-14 16:24:22
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ngjy123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by simiao8793 at 2011-01-14 12:32:24:
RNA的量可以直接用核酸定量仪检测，上样量1ul至2ul，或者用分光光度计分别测出OD260和OD280，一般需将RNA稀释一百倍左右检测。RNA的浓度=40*OD260，单位：ng/ul。
RNA的质量好坏可以看两个方面：1、OD260/280在1 ...

非常感谢！出现负值是怎么回事呢？
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6楼2011-01-14 16:25:07
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ngjy123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by ngjy123 at 2011-01-14 10:01:55:
大家有提取RNA的吗？请教大家都是用什么方法进行RNA浓度和质量检测的。谢谢了~~~

十分感谢！
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7楼2011-01-14 16:25:44
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by ngjy123 at 2011-01-14 16:25:07:

非常感谢！出现负值是怎么回事呢？

这可能与你调零用的空白液有关，建议空白和溶解RNA全用TE
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
8楼2011-01-14 16:41:17
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smilefish06

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by ngjy123 at 2011-01-14 16:24:22:

谢谢你！A260和A280都是负值，浓度也是负值是怎么回事啊？

有一种可能是你提的ＲＮＡ杂质太多，干扰了仪器吸光值，得到的值可能是负值
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做自己
9楼2011-01-14 17:15:48
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stewart3261

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
295521楼: Originally posted by ngjy123 at 2011-01-14 16:24:22
谢谢你！A260和A280都是负值，浓度也是负值是怎么回事啊？...

你在测量吸光度时用的是玻璃比色皿吧？换用石英的比色皿吧！
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10楼2012-07-19 15:25:24
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