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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助，Non-coding RNA量怎么检测，普通的pcr能检测到吗？
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980979990

新虫 (小有名气)

[求助] 求助，Non-coding RNA量怎么检测，普通的pcr能检测到吗？

老板最近迷上了一段non-coding RNA让我做这段序列表达量的检测，不知道是应该把它逆转录了再检测还是直接提了RNA做检测，但是怕操作慢了检测不见了，求各位指点指点
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980979990

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1楼 2013-09-07 10:52:41
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-09-08 20:06:11
980979990: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-09-11 08:21:40
如果你的ncRNA序列是mRNA的一部分，只能用northern检测。如果你做的ncRNA不是mRNA的一部分，还可以用rt-PCR检测。
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2楼2013-09-08 01:14:00
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980979990

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-08 01:14:00
如果你的ncRNA序列是mRNA的一部分，只能用northern检测。如果你做的ncRNA不是mRNA的一部分，还可以用rt-PCR检测。

不是mrna的一部分，直接用random引物做rt-pcr能p出条带吗，不知道你做的结果怎么样
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3楼2013-09-11 13:01:02
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
wizardfan: 金币+1, 谢谢补充 2013-09-12 05:19:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by 980979990 at 2013-09-11 13:01:02
不是mrna的一部分，直接用random引物做rt-pcr能p出条带吗，不知道你做的结果怎么样...

可以用随机引物做RT。
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4楼2013-09-12 00:43:59
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980979990

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-12 00:43:59
可以用随机引物做RT。...

昨天p过一次了，没有条带出现啊····
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5楼2013-09-12 09:51:08
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 980979990 at 2013-09-12 09:51:08
昨天p过一次了，没有条带出现啊····...

反转录后的产物用其它引物P了没有？
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6楼2013-09-12 10:23:04
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980979990

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-12 10:23:04
反转录后的产物用其它引物P了没有？...

就是用的随机引物做的逆转录DNA做的pcr，没有条带啊
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7楼2013-09-12 13:50:58
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 980979990 at 2013-09-12 13:50:58
就是用的随机引物做的逆转录DNA做的pcr，没有条带啊...

你是说没P出目标片段，还是连证对照也没有？
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8楼2013-09-13 00:33:33
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980979990

新虫 (小有名气)
送红花一朵
内参能p出来，可是我的目的条带木有哇
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9楼2013-09-13 08:07:01
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xqlcjy

银虫 (小有名气)
可能引物有问题吧，或者你的ncRNA在提取的过程中损失了，或者看看你的ncRNA序列看是否可以用OligodT引物进行反转录
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知足，知不足，不知足
10楼2013-09-13 13:42:16
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