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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助，实时荧光定量PCR没有CT值，如下图
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631783739

木虫 (小有名气)

[求助] 求助，实时荧光定量PCR没有CT值，如下图 已有7人参与

求助啊，下面就是跑出来的寂寞图，请指教。相对定量。

求助，实时荧光定量PCR没有CT值，如下图
IMG_20140730_092823.jpg


求助，实时荧光定量PCR没有CT值，如下图-1
IMG_20140730_092919.jpg


求助，实时荧光定量PCR没有CT值，如下图-2
IMG_20140730_092931.jpg


求助，实时荧光定量PCR没有CT值，如下图-3
IMG_20140730_092959.jpg
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1楼 2014-07-30 09:35:51
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
631783739: 金币+5, 没有问题啊 2014-07-30 16:27:54
看看是不是荧光信号采集点不对。
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9楼2014-07-30 16:23:43
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普通回帖

liweiwei0812

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-07-30 11:23:44
631783739: 金币+5 2014-07-30 16:06:09
应该就是没出东西，跑个胶看一下。
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2楼2014-07-30 10:19:20
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631783739

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liweiwei0812 at 2014-07-30 10:19:20
应该就是没出东西，跑个胶看一下。

跑出来了。。。有东西。。。就是不知道原因
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3楼2014-07-30 10:55:35
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爱吃鱼的牛二

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-30 15:30:27
631783739: 金币+5 2014-07-30 16:06:01
1.扩的是不是目的条带？分析一下溶解曲线。
2.实验中忘记加某种试剂。
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4楼2014-07-30 14:46:37
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happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-07-30 15:30:44
631783739: 金币+10 2014-07-30 16:07:38
请问你做定量实验设计了几对引物？没看到你的扩增曲线，从扩增曲线上可以看出引物的特异性。
建议引物多设计几对，看看哪对扩增效率高，特异性好。
定量PCR产物一般100bp左右，跑胶最好浓度高点，多跑一会儿，区分出引物二聚体。
还有一种情况是如果确实有产物，那就是你没加燃料或探针什么的。
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5楼2014-07-30 15:21:53
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631783739

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 爱吃鱼的牛二 at 2014-07-30 14:46:37
1.扩的是不是目的条带？分析一下溶解曲线。
2.实验中忘记加某种试剂。

没有少加东西，是用的SYBR染料
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6楼2014-07-30 16:05:48
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631783739

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by happydove at 2014-07-30 15:21:53
请问你做定量实验设计了几对引物？没看到你的扩增曲线，从扩增曲线上可以看出引物的特异性。
建议引物多设计几对，看看哪对扩增效率高，特异性好。
定量PCR产物一般100bp左右，跑胶最好浓度高点，多跑一会儿，区分 ...

以前同样的处理出来数据了，现在跑了个这图，
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7楼2014-07-30 16:07:44
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631783739

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by happydove at 2014-07-30 15:21:53
请问你做定量实验设计了几对引物？没看到你的扩增曲线，从扩增曲线上可以看出引物的特异性。
建议引物多设计几对，看看哪对扩增效率高，特异性好。
定量PCR产物一般100bp左右，跑胶最好浓度高点，多跑一会儿，区分 ...

以前就用这样的引物扩出来了
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8楼2014-07-30 16:08:17
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happydove

新虫 (小有名气)
那就看看仪器设置问题
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10楼2014-08-04 16:57:06
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