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舟之行

铜虫 (正式写手)

[求助] pcr 产物在跑电泳时不出条带已有6人参与

配制20 μL体系,mix、F、R、水依次加10μL*13、1μL*13、1μL*13、6μL*13于1.5mlEP管,分装成12管,每管在加入2μL  DNA
反应程序:
1、95℃    5min;
2、95℃   30s;
   50-63℃   30s;
72℃  30s;
3、Go to 2
34个循环
4、72℃ 5min;
5、4℃ 10min
6、end

总时间在2小时,但是结果发现ep底部体系变少,管盖上有水珠。
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867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece

【答案】应助回帖

加点甘油封液试下!
有些东西因为得不到而变得美好,有些东西因为拥有而变得弥足珍贵!
8楼2014-09-22 15:41:42
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xinqing617

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-14 12:29:29
盖子没盖好,蒸发掉一部分。pcr仪热盖的温度不够。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-09-13 22:31:15
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dxh86412

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-14 12:29:33
PCR上的热盖没盖好
3楼2014-09-13 22:52:15
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wopopwz123

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
舟之行(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-14 09:20:58
这个问题,首先你要确定一下顶格温度,是否是105度。有一些PCR是需要单独设置的。有时候别人30度链接,你在接着PCR可能会出现这个问题。再就是MIX有时候不太稳定,你要是反复冻融容易扩不出来。建议你换成TAQ酶试试。
4楼2014-09-14 00:13:36
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