应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr 产物在跑电泳时不出条带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 2457  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

舟之行

铜虫 (正式写手)

[求助] pcr 产物在跑电泳时不出条带 已有6人参与

配制20 μL体系，mix、F、R、水依次加10μL*13、1μL*13、1μL*13、6μL*13于1.5mlEP管，分装成12管，每管在加入2μL  DNA
反应程序：
1、95℃    5min；
2、95℃   30s；
   50-63℃   30s；
72℃  30s；
3、Go to 2
34个循环
4、72℃ 5min；
5、4℃ 10min
6、end

总时间在2小时，但是结果发现ep底部体系变少，管盖上有水珠。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
仿制药一致性评价，多肽及核酸类药物分析及代谢物分析
1楼 2014-09-13 22:28:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinqing617

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-14 12:29:29
盖子没盖好，蒸发掉一部分。pcr仪热盖的温度不够。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-09-13 22:31:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dxh86412

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-14 12:29:33
PCR上的热盖没盖好
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-09-13 22:52:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wopopwz123

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
舟之行(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-14 09:20:58
这个问题，首先你要确定一下顶格温度，是否是105度。有一些PCR是需要单独设置的。有时候别人30度链接，你在接着PCR可能会出现这个问题。再就是MIX有时候不太稳定，你要是反复冻融容易扩不出来。建议你换成TAQ酶试试。
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-14 00:13:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuenyunliu

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-09-22 16:40:31
这都不是主要问题。
1. 你的target片段多大？
2. 你的模板质量如何？
3. 引物设计如何？
4. 考虑使用touch-down没？
5. 片段是否高GC？
6. 考虑使用过别的聚合酶没？
从这几个方面排除原因  pcr一般都不是问题
赞一下 回复此楼
5楼2014-09-18 21:28:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

舟之行

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xinqing617 at 2014-09-13 22:31:15
盖子没盖好，蒸发掉一部分。pcr仪热盖的温度不够。

是热盖的问题
回复此楼
仿制药一致性评价，多肽及核酸类药物分析及代谢物分析
6楼2014-09-20 20:21:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小傻瓜@静子

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-22 16:56:36
你的目的片段有多大，CG的含量如何，引物设计是否得当，这些决定你的PCR条件，条件合适才能P出目的片段，电泳时才会显示有条带
赞一下 回复此楼
7楼2014-09-22 14:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece

【答案】应助回帖

加点甘油封液试下！
赞一下 回复此楼
有些东西因为得不到而变得美好，有些东西因为拥有而变得弥足珍贵！
8楼2014-09-22 15:41:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

舟之行

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by kuenyunliu at 2014-09-18 21:28:49
这都不是主要问题。
1. 你的target片段多大？
2. 你的模板质量如何？
3. 引物设计如何？
4. 考虑使用touch-down没？
5. 片段是否高GC？
6. 考虑使用过别的聚合酶没？
从这几个方面排除原因  pcr一般都不是问 ...

9楼2015-01-18 19:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 舟之行 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工调剂 +20 kikiki7 2026-03-30 20/1000 2026-04-03 01:19 by BruceLiu320
[考研] 085600 295分求调剂 +17 W55j 2026-03-30 21/1050 2026-04-03 01:10 by BruceLiu320
[考研] 326求调剂 +8 崽崽仔 2026-04-02 8/400 2026-04-02 23:00 by 无际的草原
[考研] 315求调剂 +11 小羊小羊_ 2026-04-02 11/550 2026-04-02 21:57 by wwytracy
[考研] 22408 266求调剂 +3 masss11222 2026-04-02 3/150 2026-04-02 18:11 by 笔落锦州
[考研] 301求调剂 +4 细胞相关蛋白 2026-04-02 8/400 2026-04-02 16:30 by 271179835
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 4/200 2026-04-02 15:56 by Jaylen.
[考研] 一志愿同济大学323分（080500）求调剂 +6 yikeniu 2026-04-01 6/300 2026-04-02 14:19 by smileboy2006
[考研] 学硕化学工程与技术，一志愿中国海洋大学320+求调剂 +8 披星河 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:12 by oooqiao
[考研] 301求调剂 +14 骆驼男人 2026-04-02 14/700 2026-04-02 14:08 by baoball
[考研] 266分，一志愿电气工程，本科材料，求材料专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-04-01 11/550 2026-04-02 11:31 by lnilvy
[考研] 298求调剂 +4 什么是胖头鱼 2026-03-30 6/300 2026-04-01 22:06 by 客尔美德
[考研] 303分 0807学硕求调剂 +3 TYC3632 2026-04-01 3/150 2026-04-01 19:24 by lwk2004
[考研] 材料专硕322分 +9 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 9/450 2026-04-01 14:30 by 无际的草原
[考研] 311求调剂一志愿合肥工业大学 +14 秋二十二 2026-03-30 14/700 2026-04-01 11:45 by chemdavid
[考研] 材料与化工272求调剂 +25 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 25/1250 2026-03-31 16:27 by hypershenger
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等调剂 +8 哇呼哼呼哼 2026-03-27 10/500 2026-03-31 13:35 by Huaxue_Wang
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 8/400 2026-03-31 08:53 by Qshers
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭