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yidaqunyan

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[求助] 恐怖的PCR电泳条带。。。。。。。。。。

恐怖的电泳条带，请各位老师看看是如何造成的，中间的竟然为marker。。。神啊，只有一条带最亮。。。两边为CDNA模板的PCR产物，左边五个泳道右边五个泳道，最靠近marker的竟然为actin。。。。神呐，竟然什么都没有出来。。右边五个泳道是诱导后的结果，和左边几个基因一一对应。。。。

为什么会造成如此神奇的情况。。。。marker为什么会跑成这个样子。。。1%的胶TAE

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不孝有三，读博为大！

1楼 2012-03-26 16:00:18

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yidaqunyan

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yidaqunyan: 回帖置顶 2012-03-27 15:48:50

引用回帖:

3楼: Originally posted by telomerase at 2012-03-26 16:29:49:
你的二聚体不急，少点引物能解决
你p的结果不太对吧，actin度没有，体系应该是有问题的
再说这个跑胶，marker跑这样，胶配的不好。第二次电压不高还弯成个那样

你的电泳槽里的buffer是新的吗？

查出来了，是gold view的问题，换了gold view1就好了，以前用的2~谢谢大家了

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12楼2012-03-27 15:48:43

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yidaqunyan

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然后我换了2的胶，然后把电压由150调到50 ，又跑了一次，更诡异的事情发生了，分离的更具体了，好华丽的引物二聚体啊。。。关键是，我已经在25微升的体系中只加了1微升的引物（1μM）。。。。还有这么华丽的二聚体。。。marker还是这个样子。。marker是康为世纪的DM2000.。。。。。。貌似确实是我的目的条带。。。
为什么是这个样子。。。

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不孝有三，读博为大！

2楼2012-03-26 16:04:30

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