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双酶切的目的基因与质粒连接不上怎么办 已有5人参与
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| 我刚刚开始做分子克隆，将双酶切的基因片段大约1600bp与相同双酶切的质粒进行连接，电泳显示两个片段都很亮，酶切反应37摄氏度，2小时。使用T4 连接酶进行16摄氏度过夜连接，设置了阳性对照（仅含空质粒），在含有抗性的平板上进行涂布，结果阳性对照组长出很多菌落，而实验组几乎不长菌落，长出的菌落进行菌落PCR得到的条带也不是我所期望的，请大家帮帮忙，看我哪里出现了问题。 |
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3楼2014-09-01 16:33:31
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你好， 可以参考一下这个帖子： http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7727916 |
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10楼2014-09-02 18:08:41
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