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sunyu65045

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
20楼: Originally posted by zhaodahe at 2014-09-03 09:38:50
我没测过浓度,都是这么做的,也比较顺利。只是个参考,你可以尝试一下。祝你顺利!...

还有个问题想请教您一下,我刚提取的质粒只有一条条带且与质粒开环状态大小一致,我的原始质粒里没有目的条带,双酶切质粒的大小跟没有经过酶切的质粒大小一样,这样的质粒还能继续使用吗,我一直连接不上是不是跟智力有关系?麻烦您了
21楼2014-09-03 10:01:12
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)


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表达的蛋白是不是有毒,我也不清楚,如果是有毒,你要用bl21plyss菌株

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22楼2014-09-03 10:10:30
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sunyu65045

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
22楼: Originally posted by bio_sci at 2014-09-03 10:10:30
表达的蛋白是不是有毒,我也不清楚,如果是有毒,你要用bl21plyss菌株

表达的蛋白没有毒,我提取的质粒是线性状态的,能用酶切开吗?
23楼2014-09-03 10:52:44
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-09-04 19:39:10
引用回帖:
21楼: Originally posted by sunyu65045 at 2014-09-03 10:01:12
还有个问题想请教您一下,我刚提取的质粒只有一条条带且与质粒开环状态大小一致,我的原始质粒里没有目的条带,双酶切质粒的大小跟没有经过酶切的质粒大小一样,这样的质粒还能继续使用吗,我一直连接不上是不是跟 ...

我遇到比较多的情况,是刚提取跑电泳超螺旋和开环的质粒相对较多,提取的好的话超螺旋更多,而线性的很少几乎没有;如果质粒经双酶切,两个酶切位点很近,得到的质粒跟线性的大小差不多,你的结果是跟开环大小差不多,是不是酶切的问题或者别的。
24楼2014-09-03 12:18:16
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-04 19:39:20
引用回帖:
14楼: Originally posted by hajierlove at 2014-09-02 20:40:29
亲,我4度过夜,影响大吗...

不大   但是我觉得时间应该长点
25楼2014-09-04 08:50:34
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落叶的轨迹

金虫 (初入文坛)

选择的质粒合适么?我原来的实验只能连blunt,不能连T

[ 发自小木虫客户端 ]
26楼2014-09-04 09:11:24
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