| 查看: 1518 | 回复: 4 | ||||
wangweijian金虫 (小有名气)
|
[求助]
目的基因是否从质粒上掉落下来 已有3人参与
|
| 工程菌提取质粒，跑电泳可以看到质粒条带很亮，但是做PCR验证质粒里面是否含有目的基因时，几乎没有PCR产物，是不是目的基因从质粒上掉落了？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有103人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 如何检测目的片段转没转到质粒上？
已经有16人回复
- 如果质粒里面有氨苄，是不是算选择标记基因？
已经有4人回复
- 以质粒DNA为模板的PCR问题
已经有5人回复
- 用的pCDNA-5重组质粒，通过测序检验质粒+目的基因是否构建成功
已经有5人回复
- 有人做过双报告基因的过表达质粒载体么？
已经有5人回复
- 目的基因与载体连接问题
已经有8人回复
- 将目的基因连入表达质粒，酶切位点问题
已经有3人回复
- 目的基因连T载体能连上，双酶切后连不上HTB质粒，都三个月了，纠结啊。。。
已经有21人回复
- 求高手帮忙看看这个质粒图谱！我目的基因的启动子和终止子各是什么喃？
已经有12人回复
- 目的基因连接表达载体的质粒PCR验证，结果出现2条带
已经有10人回复
- 基因克隆过程中质粒、感受态细胞对氨苄的抗性
已经有9人回复
- 目的基因连接到克隆载体后提取质粒测序，序列有问题
已经有11人回复
- 重建质粒之目的基因
已经有6人回复
- 克隆质粒上的基因需要将质粒酶切成线性吗？
已经有15人回复
- 对未知野生质粒如何确定它是否带抗性基因
已经有4人回复
- 已经带his标签目的蛋白基因如何设计引物啊（目的基因已经接在pET-22b的载体上了）
已经有8人回复
- 质粒上的基因敲除与染色体上的基因敲除有什么区别吗？
已经有8人回复
- 荧光素酶报告基因的内参质粒选择
已经有3人回复
- 【求助/交流】质粒跟目的基因连接不上怎么办
已经有17人回复
- 【求助/交流】目的基因连接表达载体后涂板不长菌
已经有11人回复
- 【求助/交流】在构建基因表达载体的时候什么时候需要人为地在上面加上启动子？
已经有6人回复
for5
木虫 (正式写手)
- 应助: 127 (高中生)
- 金币: 3356.6
- 红花: 10
- 帖子: 880
- 在线: 283.6小时
- 虫号: 696070
- 注册: 2009-02-04
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2014-04-11 13:42:42
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10391.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wangweijian(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-11 14:35:48
wangweijian: 金币+3, ★★★很有帮助, 可能是高浓度的质粒会抑制PCR反应，我稀释下看看 2014-04-12 10:14:20
感谢参与，应助指数 +1
wangweijian(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-11 14:35:48
wangweijian: 金币+3, ★★★很有帮助, 可能是高浓度的质粒会抑制PCR反应，我稀释下看看 2014-04-12 10:14:20
|
哈哈，那质粒为啥就喜欢把你的片段丢了？？。。。它怎么知道你的片段长在哪？你的片段两侧有同源序列吗？即便有，常规分子克隆的宿主菌都是重组缺陷型的，一些病毒载体因为必须带上LTR，也没见全部丢掉的。 质粒PCR没有产物，得看你有没有阳性对照。 再说，既然质粒都抽出来了，最好酶切鉴定。这个是金标准。 另，质粒相容不相容，主要取决于复制子，跟质粒的其他元件无关。 |
3楼2014-04-11 14:14:30
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2014-04-11 14:25:49
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10391.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
5楼2014-04-11 14:32:05
10