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草帽小子

银虫 (小有名气)

[求助] 求高手帮忙看看这个质粒图谱!我目的基因的启动子和终止子各是什么喃? 已有3人参与

这是宝生物的产品PRI201-AN-GUS,我构建的植物表达载体就是直接将目的片段连入MCS2处。请问我目的基因的启动子和终止子各是什么喃?求高手帮忙看看这个质粒图谱!我目的基因的启动子和终止子各是什么喃?
PRI201-AN-GUS.jpg

[ Last edited by 草帽小子 on 2013-7-9 at 11:16 ]
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bleach060452

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励应助解答楼主问题! 2013-07-09 13:48:24
引用回帖:
3楼: Originally posted by 草帽小子 at 2013-07-09 13:10:12
我知道这是说明书上的内容,只是不是很清楚,目的基因在HSP的下游,靠什么启动和终止呢?...

多克隆位点序列最后有终止密码子,启动子应该是35S

我的理解,供参考
求高手帮忙看看这个质粒图谱!我目的基因的启动子和终止子各是什么喃?-1
QQ截图20130709133155.png

岂能尽如人意,但求无愧我心
4楼2013-07-09 13:34:50
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bleach060452

新虫 (小有名气)

或者更简单,直接咨询TAKARA技术支持,准没错~~
岂能尽如人意,但求无愧我心
5楼2013-07-09 13:35:57
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普通回帖

bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-07-09 12:51:46
草帽小子: 金币+2, 有帮助 2013-07-09 13:10:22
pRI 201-AN-GUS DNA是一种在双子叶植物细胞中表达大肠杆菌β- 葡萄糖苷酸酶( GUS) 基因的双元载体,在35S启动子下游,有一个拟南芥乙醇脱氢酶 (ADH) 基因的5’非编码区 (5’-UTR),作为转录增强子和一个拟南芥热激蛋白 (HSP) 基因的高效终止子。MCS2处于HSP终止子的下游,在这里插入外源基因的表达框,可以使多个基因同时表达。拟南芥ADH的5’非编码区 (5’-UTR) 可以在双子叶植物如拟南芥、烟草中起翻译增强子的作用。不能在单子叶植物如水稻中起作用。
pRI 201-AN-GUS DNA是一个穿梭载体,可以在E.coli 和Rhizobium (Agrobacterium) 中进行自主复制。

http://www.takara.com.cn/?action ... &subclass=1
岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-07-09 12:19:09
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草帽小子

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-09 12:19:09
pRI 201-AN-GUS DNA是一种在双子叶植物细胞中表达大肠杆菌β- 葡萄糖苷酸酶( GUS) 基因的双元载体,在35S启动子下游,有一个拟南芥乙醇脱氢酶 (ADH) 基因的5’非编码区 (5’-UTR),作为转录增强子和一个拟南芥热激蛋 ...

我知道这是说明书上的内容,只是不是很清楚,目的基因在HSP的下游,靠什么启动和终止呢?
海贼王,我当定了
3楼2013-07-09 13:10:12
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草帽小子

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-09 13:34:50
多克隆位点序列最后有终止密码子,启动子应该是35S

我的理解,供参考

QQ截图20130709133155.png
...

终止密码子可以当终止子用吗?两个有什么差异吗?目的基因最后一般都带终止密码子,为什么一般的载体都有终止子呢?
海贼王,我当定了
6楼2013-07-09 20:52:45
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草帽小子

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-09 13:35:57
或者更简单,直接咨询TAKARA技术支持,准没错~~

呵呵,就是今天打了一天电话没打通,着急了····大家也以来共同探讨一哈啊,感觉跟一般的载体不一样啊!
海贼王,我当定了
7楼2013-07-09 20:54:15
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20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
草帽小子: 金币+2, 有帮助 2013-07-12 15:57:45
终止密码子和终止子根本就是两码事,终止密码子是3个碱基,终止子是相对于启动子而言的,其长度至少在7-8个碱基
8楼2013-07-09 21:26:56
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20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
草帽小子: 金币+2, 有帮助 2013-07-11 20:38:35
草帽小子: 金币+2, 有帮助 2013-07-12 15:57:51
并且,终止子只在翻译后的过程中起作用,
9楼2013-07-09 21:27:41
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孙敏涛

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 20083630zhan at 2013-07-09 21:27:41
并且,终止子只在翻译后的过程中起作用,

终止子是转录停止时起作用;终止密码子是在翻译终止时起作用。楼上说错了吧。
10楼2014-04-24 21:04:13
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