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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 以质粒DNA为模板的PCR问题
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)

[求助] 以质粒DNA为模板的PCR问题已有3人参与

大家好，当我们以质粒DNA为模板进行PCR时，通常抽提的质粒包含线性、开环和超螺旋三种形态，如果这三种形态的含量比例发生变化，是否会影响PCR的扩增效率？
谢谢！
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rainwater
1楼2014-03-14 09:35:17
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
...............
    NO变化
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Let God do with it as He wills
2楼2014-03-14 10:34:56
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hg30717580

木虫 (职业作家)

总经理

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhangyunjing(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:02:05
不会影响的。变性后都变成单链了
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突破自我，喜迎曙光
3楼2014-03-14 13:11:38
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王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhangyunjing(gyesang代发): 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:01:44
会有微量影响的，超螺旋的含量越高扩增效率自然越好，只是PCR对模板要求不高，只要模板中含有目的序列，无论链状、开环亦或超螺旋都是一样的。我这里所说的微量影响是指链状或者开环状质粒可能在目的序列区域有破坏，这样会降低实际可利用模板量，从而影响效率，不过一般情况下可以忽略不计的，毕竟提取的质粒不会很糟的，况且菌液都是可以做模板的。
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没有做不到，只有想不到！
4楼2014-03-16 13:35:54
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhangyunjing(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:01:53
不会影响，预变性都解链成单链。
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hehe
5楼2014-03-16 15:20:06
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雪lovesnow

新虫 (小有名气)
请问质粒作为模板需要稀释吗？您一般稀释多少倍呢?
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6楼2019-05-29 12:09:53
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