| 查看: 1018 | 回复: 4 | ||
uuu555000捐助贵宾 (正式写手)
|
[求助]
关于菌液PCR的DNA模板制备，
|
| 最近看了关于菌液pcr的DNA模板的制备，这种方法很简便，我们实验室条件有限，无液氮，目前考虑这种方法，实验室目前研究尖孢镰刀菌，看文献看过关于酵母菌的菌液pcr，愣是没找到关于尖孢镰刀菌的菌液PCR的DNA模板制备的方法，求关于尖孢镰刀菌的菌液PCR的DNA模板制备的方法， |
回复此楼» 猜你喜欢
2024国自然会评日期
已经有14人回复
-
国家资助计划
已经有11人回复
-
国自然地区项目不知道今年能卷成什么样
已经有8人回复
-
统计一波计分系数
已经有8人回复
-
科研之友最近访客那出现来自北京的未知用户，什么情况？
已经有62人回复
-
现在申请CSC的国外访问学者，通过率是不是 很低，主要看重什么？？
已经有4人回复
-
工材口，今年的面上和青年资助率多少呢，大家有消息了吗？
已经有13人回复
-
2024上会名单已出
已经有14人回复
-
自科会评
已经有15人回复
-
佛山大学和深职大怎么选？
已经有21人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教RNA提取高手：反转录PCR（RT-PCR)中DNA的去除
已经有18人回复
- 合成一段DNA的问题？引物，PCR
已经有13人回复
- 提取土壤DNA，如何去除腐殖质等PCR抑制物？
已经有17人回复
- 根据已知序列，从相同菌种(菌株编号不同)中能PCR出目的基因吗？
已经有6人回复
- 荧光定量PCR中模板采用直接提取的DNA与构建目标片段质粒模板有什么区别？
已经有6人回复
- 看看我的DNA提取及PCR结果有什么问题
已经有11人回复
- 转基因植株DNA PCR检测要不就不出带，要不就连水和阴性对照都出带？？？急急急！！！
已经有10人回复
- 单链DNA做pcr模板可以吗
已经有4人回复
- 【求助/交流】以DNA为模板做PCR这么难！
已经有13人回复
- DNA分子克隆与PCR扩增DNA的区别？
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于引物
已经有20人回复
- 【求助/交流】细菌基因组为模板做pcr的问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】在提取细菌DNA基因组做为PCR模板时，如何保证各个DNA模板的浓度相近
已经有6人回复
- 【分享】DNA重组实验中的部分技术
已经有159人回复
uuu555000
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2575.5
- 散金: 156
- 红花: 1
- 帖子: 800
- 在线: 288.2小时
- 虫号: 536447
- 注册: 2008-03-31
- 专业: 生物化学
2楼2012-03-10 06:12:46
xstarsky
铁杆木虫 (正式写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 60 (初中生)
- 金币: 6721.4
- 红花: 2
- 帖子: 536
- 在线: 221小时
- 虫号: 67896
- 注册: 2005-05-15
- 专业: 作物分子育种
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
①25mg菌丝干粉于1.5mL离心管； ②加入500uL提取缓冲液（5mM/L Tris-HCl，pH8.0; 150mM/L NaCl，100mM/L EDTA）悬浮干粉，在涡流振荡器上混匀； ③加入50uL 10% SDS和2uL 20mg/mL的蛋白酶K，37℃温浴1h； ④加入75uL 5M/L NaCl和65uL CTAB/NaCl溶液，65℃温育20min； ⑤用等体积的苯酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）抽提1次，10，000g离心10min，取上清液移至干净管中； ⑥将上清液，再加入等体积的氯仿：异戊醇（24：1）抽提1次； ⑦如水相与有机相之间仍有杂质，再重复抽提过程； ⑧上清液中加入0.6倍体积的异丙醇沉淀DNA（-20℃放置1-2h），10,000g离心10min； ⑨取沉淀，加70%乙醇洗1遍； ⑩真空干燥后将DNA溶解在TE缓冲液（10mM Tris-HCl,pH7.5; 0.1mMEDTA中，-70℃保存）。 |
3楼2012-03-10 07:43:41
bigboy123
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 149.8
- 散金: 7
- 帖子: 84
- 在线: 13.3小时
- 虫号: 381419
- 注册: 2007-05-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2012-03-10 07:52:02
lw19850128
银虫 (小有名气)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 477.2
- 红花: 1
- 帖子: 159
- 在线: 61.9小时
- 虫号: 1091028
- 注册: 2010-09-06
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
5楼2012-10-09 09:30:56
5