24小时热门版块排行榜    

查看: 2044  |  回复: 9

mangmanglulu

金虫 (小有名气)

[交流] 基因克隆过程中质粒、感受态细胞对氨苄的抗性 已有4人参与

基因克隆过程中质粒、感受态细胞对氨苄的抗性如何?
假如质粒没有转入到感受态中,在添加AMP的板子上有没有菌落呢?
主要是想询问连接转化过程中,那个因素在决定着对AMP的抗性呢?是质粒有抗性基因还是感受态细胞有呢?
请大家指教........
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

一般是质粒!!!!!!
2楼2013-03-15 11:20:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
抗性基因当然是在质粒或者构建的载体上的,如果感受态有抗性,还称得上是筛选平板吗?当然,有些工程感受态细胞对一些特定基因做了突变,菌体本身是携带抗性基因的,使用时对携带相同抗性的载体要注意。
3楼2013-03-15 11:26:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mangmanglulu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-15 11:26:04
抗性基因当然是在质粒或者构建的载体上的,如果感受态有抗性,还称得上是筛选平板吗?当然,有些工程感受态细胞对一些特定基因做了突变,菌体本身是携带抗性基因的,使用时对携带相同抗性的载体要注意。

如果说质粒没有转进去,板子是不是就不会长出菌落呢?
4楼2013-03-15 12:13:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mangmanglulu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2013-03-15 11:20:11
一般是质粒!!!!!!

如果板子上长出来菌落了 是不是就证明质粒转进去了呢?
5楼2013-03-15 12:13:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by mangmanglulu at 2013-03-15 12:13:14
如果说质粒没有转进去,板子是不是就不会长出菌落呢?...

是的。如果长了说明抗性板筛选压力不足或者是操作感受态细胞过程中污染了。
6楼2013-03-16 00:29:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixinyuan

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-15 11:26:04
抗性基因当然是在质粒或者构建的载体上的,如果感受态有抗性,还称得上是筛选平板吗?当然,有些工程感受态细胞对一些特定基因做了突变,菌体本身是携带抗性基因的,使用时对携带相同抗性的载体要注意。

一般来说,用氨苄筛选阳性克隆时,没有转化成功一般氨苄平板是不会有菌落的,除非有污染或者氨苄失效
7楼2013-03-16 11:09:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixinyuan

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-15 11:26:04
抗性基因当然是在质粒或者构建的载体上的,如果感受态有抗性,还称得上是筛选平板吗?当然,有些工程感受态细胞对一些特定基因做了突变,菌体本身是携带抗性基因的,使用时对携带相同抗性的载体要注意。

一般来说,用氨苄筛选阳性克隆时,没有转化成功一般氨苄平板是不会有菌落的,除非有污染或者氨苄失效
8楼2013-03-16 11:12:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mangmanglulu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by yixinyuan at 2013-03-16 11:12:15
一般来说,用氨苄筛选阳性克隆时,没有转化成功一般氨苄平板是不会有菌落的,除非有污染或者氨苄失效...

谢谢诸位帮忙!
9楼2013-03-19 09:41:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qqxs

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
质粒上的抗性基因决定了转化子具有什么样的抗性,选择的抗生素一定是感受态细胞敏感的,否则无法作为筛选标记。即,未转入质粒不生长。你应该自己查看所有质粒的图谱和感受态菌种的性状。
10楼2013-03-19 11:11:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mangmanglulu 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283求调剂 +8 小楼。 2026-03-12 11/550 2026-03-16 09:46 by 无际的草原
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +8 不知道叫什么! 2026-03-15 9/450 2026-03-16 07:45 by L135790
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 085600材料与化工 326 求调剂 +5 热爱生活ing 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:39 by JourneyLucky
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 工科,求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
[考研] 哈工大材料324求调剂 +6 闫旭东 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:49 by 星空星月
[考研] 一志愿:武汉理工,材料工程,英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
[考研] 294 英二数二物化 求调剂 +6 米饭团不好吃 2026-03-09 6/300 2026-03-09 23:55 by barlinike
信息提示
请填处理意见