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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】冻干的质粒怎么活化呢？
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bla2009

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】冻干的质粒怎么活化呢？ 已有5人参与

刚从公司合成了段基因，拿到的是冻干的质粒DNA和含有重组质粒的甘油菌或穿刺菌，请问我该怎么分别活化使用呢？有什么注意事项不？请高手指教，谢谢
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等笨笨
1楼 2011-02-22 22:17:09
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
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翱宇(金币+1): 谢谢交流 2011-02-22 23:06:54

质粒DNA加TE溶解，转化至宿主菌就OK了。

甘油菌或者穿刺菌可以直接平板划线培养，挑单克隆摇菌。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-02-22 22:42:00
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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dhd997(金币+1): 来晚了？？？呵呵 2011-02-23 09:45:25

我来晚了………………还是继续看美剧去……
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3楼2011-02-22 22:50:45
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aben1

金虫 (小有名气)
★
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您老人家终于开始做实验了

[ Last edited by aben1 on 2011-2-22 at 23:21 ]
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4楼2011-02-22 23:12:06
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bla2009

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by bla2009 at 2011-02-22 14:17:09:
刚从公司合成了段基因，拿到的是冻干的质粒DNA和含有重组质粒的甘油菌或穿刺菌，请问我该怎么分别活化使用呢？有什么注意事项不？请高手指教，谢谢

那加多少TE溶解比较合适呢，一般质粒和感受态细胞的转化比例是多少呢？还有，甘油菌我可以直接挑了试管摇菌扩增么，我只是想验证下我合成的基因。
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等笨笨
5楼2011-02-22 23:17:51
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

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dhd997(金币+2): good 2011-02-23 09:45:11
引用回帖:
Originally posted by bla2009 at 2011-02-22 15:17:51:
那加多少TE溶解比较合适呢，一般质粒和感受态细胞的转化比例是多少呢？还有，甘油菌我可以直接挑了试管摇菌扩增么，我只是想验证下我合成的基因。

,这个是分子生物学最基本的啊。。。。。。

建议你花半个小时看看分子克隆手册的  质粒转化那节。。。。。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
6楼2011-02-23 00:00:27
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无启

木虫 (正式写手)
前来学习
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志存高远，脚踏实地。
7楼2013-05-29 18:13:07
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