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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌种冻干粉如何活化
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bobo20082888

铜虫 (著名写手)

[求助] 菌种冻干粉如何活化 已有1人参与

以前只用过甘油管活化，不知道冻干粉怎么活化。
是直接倒在培养基里放摇床活化，还是涂在平板上，据说是要用什么溶一下再活化。有的资料说菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需连续两次继代培养才能 正常生长。
请不吝赐教，具体的步骤和注意事项是什么？非常感谢！
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1楼 2011-05-24 08:26:59
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restart2010

铜虫 (小有名气)
期待高人的答案
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真情猎人
2楼2011-05-24 09:08:53
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

bobo20082888(金币+2): 谢谢 2011-05-24 09:50:50
用0.5ml无菌生理盐水溶解，在平板上划线或涂面到平板上培养，即可得到活化的菌种，再进行下一步实验。
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3楼2011-05-24 09:16:41
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wgy2007

木虫 (小有名气)
打错了一个字，是涂“布”到平板上
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4楼2011-05-24 09:18:03
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feixuelff

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

bobo20082888(金币+2): 谢谢 2011-05-24 10:51:41
amisking(EPI+1): 鼓励应助 2011-05-24 21:12:22
小木虫: 金币+2, 帖子真精彩 2015-05-06 09:23:30
一、 菌种管开启方法
1 用浸过 75 ％酒精的脱脂棉擦净菌种管。
2 将菌种管顶端在火焰上加热，注意避免直接加热菌体或加热过度。
3 将无菌水滴至加热过的菌种管顶端，使玻璃开裂。
4 用锉刀或镊子敲下已开裂的菌种管的顶端。
二、 菌种活化培养
1 用无菌吸管吸取 0.3mL-0.4mL 适宜（ ※ ）的液体培养基，滴入菌种管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解成悬浮状液体。
☆ 一般细菌建议使用胰蛋白胨大豆肉汤（TSB）、脑心浸液肉汤（BHI）等高营养的培养基
☆ 嗜盐性弧菌建议使用含 3%-3.5% 氯化钠的胰蛋白胨大豆肉汤
☆ 乳酸菌建议使用 MRS 肉汤
☆ 真菌建议使用真菌培养基
2 取约 0.2mL 菌悬液，转接于特定的琼脂培养基斜面或平板上，剩余的菌液注入特定的液
体培养基（ 3mL-4mL）内，然后再按照菌种的特性，在一定温度下进行培养。
三、 注意事项
1 菌种活化前，请将冻干菌种管冷藏保存在 5 ℃ -10 ℃ 环境下。
2 厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧
状态。
3 菌种经过冷冻干燥后，生长延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。
4 菌种活化及使用过程应做好安全防护工作。

第二代第 2 代)观察是否具有典型的菌落形态 ,然后挑取单一的纯菌落 ,进行革兰染色、 镜检 ,观察其染色特征及菌体形态 ,并进一步做生化鉴定实验以确定菌种。第三代为工作用菌
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走自己的路，相信自己，掌握自己的命运
5楼2011-05-24 09:56:47
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zhoubh07

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
225388楼: Originally posted by feixuelff at 2011-05-24 09:56:47:
一、 菌种管开启方法
1 用浸过 75 ％酒精的脱脂棉擦净菌种管。
2 将菌种管顶端在火焰上加热，注意避免直接加热菌体或加热过度。
3 将无菌水滴至加热过的菌种管顶端，使玻璃开裂。
4 用锉刀或镊子敲下已开裂的 ...

请问那0.2ml划平板的菌液是做什么的
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6楼2012-03-26 20:00:37
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纯白时光fly

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by feixuelff at 2011-05-24 09:56:47
一、 菌种管开启方法
1 用浸过 75 ％酒精的脱脂棉擦净菌种管。
2 将菌种管顶端在火焰上加热，注意避免直接加热菌体或加热过度。
3 将无菌水滴至加热过的菌种管顶端，使玻璃开裂。
4 用锉刀或镊子敲下已开裂的菌 ...

如果是厌氧菌，在厌氧环境中酒精灯无法点燃，该咋么打开菌种管。
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7楼2014-05-26 19:51:09
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jiweiweiw

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhoubh07 at 2012-03-26 20:00:37
请问那0.2ml划平板的菌液是做什么的...

这0.2ml的才是最关键的，在平板上划线或者涂布，培养出后得到单菌落以进一步筛选。“剩余的菌液注入特定的液体培养基（ 3mL-4mL）内”培养，等于是将筛选省去，直接进行复壮、扩增。我是这么认为的，希望对你有帮助。我做的话都是全部涂平板筛选，保单菌于甘油管内冻存。补充一下我做的E.coli。
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8楼2015-05-05 22:20:13
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suhong921212

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by feixuelff at 2011-05-24 09:56:47
一、 菌种管开启方法
1 用浸过 75 ％酒精的脱脂棉擦净菌种管。
2 将菌种管顶端在火焰上加热，注意避免直接加热菌体或加热过度。
3 将无菌水滴至加热过的菌种管顶端，使玻璃开裂。
4 用锉刀或镊子敲下已开裂的菌 ...

楼主，我的放线菌安管应该加入什么样的液体培养基？
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9楼2016-09-21 14:43:19
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