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bobo20082888铜虫 (著名写手)
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菌种冻干粉如何活化 已有1人参与
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以前只用过甘油管活化，不知道冻干粉怎么活化。 是直接倒在培养基里放摇床活化，还是涂在平板上，据说是要用什么溶一下再活化。有的资料说菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需连续两次继代培养才能 正常生长。 请不吝赐教，具体的步骤和注意事项是什么？非常感谢！ |
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 生物技术/方法讲解 |
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【答案】应助回帖
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一、 菌种管开启方法 1 用浸过 75 ％酒精的脱脂棉擦净菌种管。 2 将菌种管顶端在火焰上加热，注意避免直接加热菌体或加热过度。 3 将无菌水滴至加热过的菌种管顶端，使玻璃开裂。 4 用锉刀或镊子敲下已开裂的菌种管的顶端。 二、 菌种活化培养 1 用无菌吸管吸取 0.3mL-0.4mL 适宜（ ※ ）的液体培养基，滴入菌种管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解成悬浮状液体。 ☆ 一般细菌建议使用胰蛋白胨大豆肉汤（TSB）、脑心浸液肉汤（BHI）等高营养的培养基 ☆ 嗜盐性弧菌建议使用含 3%-3.5% 氯化钠的胰蛋白胨大豆肉汤 ☆ 乳酸菌建议使用 MRS 肉汤 ☆ 真菌建议使用真菌培养基 2 取约 0.2mL 菌悬液，转接于特定的琼脂培养基斜面或平板上，剩余的菌液注入特定的液 体培养基（ 3mL-4mL）内，然后再按照菌种的特性，在一定温度下进行培养。 三、 注意事项 1 菌种活化前，请将冻干菌种管冷藏保存在 5 ℃ -10 ℃ 环境下。 2 厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧 状态。 3 菌种经过冷冻干燥后，生长延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。 4 菌种活化及使用过程应做好安全防护工作。 第二代第 2 代)观察是否具有典型的菌落形态 ,然后挑取单一的纯菌落 ,进行革兰染色、 镜检 ,观察其染色特征及菌体形态 ,并进一步做生化鉴定实验以确定菌种。第三代为工作用菌 |
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