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【求助/交流】甘油保种的菌种活化
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darymellon
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【求助/交流】甘油保种的菌种活化
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请问,用甘油保藏的菌种该如何活化?能不能直接涂平板活化?谢谢!
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2010-08-13 11:23:11
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scelab(金币+3):han...有个错别字 2010-08-13 18:38:47
引用回帖:
Originally posted by
darymellon
at 2010-08-13 11:23:11:
请问,用甘油保藏的菌种该如何活化?能不能直接涂平板活化?谢谢!
什么叫活化? 甘油菌是可以直接使用的菌种?直接接种到药瓶都是可以的,就和液氮保存的细胞一样,复苏了就可以直接用。
哪儿来活化这个别扭的概念?
当然你硬是要接种到平板上也没有办法, 多此一举而已。
逼人做了快100个甘油菌的质粒抽提工作,每次都是直接先接种试管,到下午下班前接种到大药瓶,第二天抽质粒的。
从来没搞过啥活化, 效果还不错
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2010-08-13 12:49:18
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平板划线,挑取菌落活化
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在哪里~在哪里见过你~
2楼
2010-08-13 11:25:57
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也可以斜面活化,只要注意培养条件就可以
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2010-08-13 11:50:43
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scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-08-13 18:38:59
引用回帖:
Originally posted by
皖山潜凤
at 2010-08-13 12:49:18:
什么叫活化? 甘油菌是可以直接使用的菌种?直接接种到药瓶都是可以的,就和液氮保存的细胞一样,复苏了就可以直接用。
哪儿来活化这个别扭的概念?
当然你硬是要接种到平板上也没有办法, 多此一 ...
提质粒这样操作当然没有问题的。如果做表达,还是需要划线活化---挑单菌落摇菌-----扩大培养,这样的步骤的。如果活化不做好,有时候基因是不表达的,这个有时候的概率还挺大。
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Thank-you,so-blue.
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2010-08-13 14:04:52
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液体培养基先活化,然后平板划线培养箱培养,挑单菌落扩大培养
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2010-08-13 14:38:04
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scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-08-13 18:39:08
可以平板活化啊。。。直接用接种环醮取少量划线即可。。。长出菌落后挑取单菌落于摇瓶中培养即可!
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2010-08-13 14:56:19
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Originally posted by
susizheng
at 2010-08-13 14:04:52:
提质粒这样操作当然没有问题的。如果做表达,还是需要划线活化---挑单菌落摇菌-----扩大培养,这样的步骤的。如果活化不做好,有时候基因是不表达的,这个有时候的概率还挺大。
表达也做了,没啥问题, 当然本人也只是做了两个表达, 基本都是直接用甘油菌摇菌的。效果很好,表达了四次都没有问题。
请问活化的原理是啥? 从单克隆角度来说, 你这个活化操作无法就是做一个亚克隆, 纯化一下菌种。
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2010-08-16 13:05:33
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这几天就在做甘油菌,提质粒呢~我是先把冻的菌平板划线,挑出单克隆后摇菌,大概12h,就可以提质粒了。当然平板和摇菌所用培养基里要加筛选标记~希望有帮到你~
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“幸福”就是猫吃鱼,狗吃肉,奥特曼打小怪兽~
10楼
2010-08-16 13:46:23
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