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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】甘油保种的菌种活化
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darymellon

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】甘油保种的菌种活化 已有11人参与

请问，用甘油保藏的菌种该如何活化？能不能直接涂平板活化？谢谢！
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1楼 2010-08-13 11:23:11
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

皖山潜凤

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):han...有个错别字 2010-08-13 18:38:47
引用回帖:
Originally posted by darymellon at 2010-08-13 11:23:11:
请问，用甘油保藏的菌种该如何活化？能不能直接涂平板活化？谢谢！

什么叫活化？    甘油菌是可以直接使用的菌种？直接接种到药瓶都是可以的，就和液氮保存的细胞一样，复苏了就可以直接用。

哪儿来活化这个别扭的概念？

当然你硬是要接种到平板上也没有办法， 多此一举而已。

逼人做了快100个甘油菌的质粒抽提工作，每次都是直接先接种试管，到下午下班前接种到大药瓶，第二天抽质粒的。

从来没搞过啥活化，   效果还不错
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4楼2010-08-13 12:49:18
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bunny0512

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
平板划线,挑取菌落活化
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在哪里~在哪里见过你~
2楼2010-08-13 11:25:57
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njhncn

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
也可以斜面活化，只要注意培养条件就可以
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3楼2010-08-13 11:50:43
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
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scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-08-13 18:38:59
引用回帖:
Originally posted by 皖山潜凤 at 2010-08-13 12:49:18:



什么叫活化？    甘油菌是可以直接使用的菌种？直接接种到药瓶都是可以的，就和液氮保存的细胞一样，复苏了就可以直接用。

哪儿来活化这个别扭的概念？

当然你硬是要接种到平板上也没有办法， 多此一 ...

提质粒这样操作当然没有问题的。如果做表达，还是需要划线活化---挑单菌落摇菌-----扩大培养，这样的步骤的。如果活化不做好，有时候基因是不表达的，这个有时候的概率还挺大。
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Thank-you，so-blue.
5楼2010-08-13 14:04:52
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violet.zhou

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
液体培养基先活化，然后平板划线培养箱培养，挑单菌落扩大培养
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6楼2010-08-13 14:38:04
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yangjunzju

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-08-13 18:39:08
可以平板活化啊。。。直接用接种环醮取少量划线即可。。。长出菌落后挑取单菌落于摇瓶中培养即可！
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7楼2010-08-13 14:56:19
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darymellon

金虫 (小有名气)
十分感谢大家！
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8楼2010-08-13 15:48:11
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皖山潜凤

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-08-13 14:04:52:

提质粒这样操作当然没有问题的。如果做表达，还是需要划线活化---挑单菌落摇菌-----扩大培养，这样的步骤的。如果活化不做好，有时候基因是不表达的，这个有时候的概率还挺大。

表达也做了，没啥问题， 当然本人也只是做了两个表达，  基本都是直接用甘油菌摇菌的。效果很好，表达了四次都没有问题。


请问活化的原理是啥？   从单克隆角度来说， 你这个活化操作无法就是做一个亚克隆，  纯化一下菌种。
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9楼2010-08-16 13:05:33
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云泽紫樱

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这几天就在做甘油菌，提质粒呢~我是先把冻的菌平板划线，挑出单克隆后摇菌，大概12h，就可以提质粒了。当然平板和摇菌所用培养基里要加筛选标记~希望有帮到你~
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“幸福”就是猫吃鱼，狗吃肉，奥特曼打小怪兽~
10楼2010-08-16 13:46:23
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