| 查看: 1955 | 回复: 4 | ||
[求助]
关于基因重组过程中的去磷酸化和连接
|
|
在基因重组过程中，质粒载体单酶切后进行去磷酸化。目的片段通过PCR获得后，也进行酶切。这样获得的酶切质粒和目的基因片段可以直接连接，然后导入大肠杆菌的感受态细胞吗？还是要把目的基因片段进行磷酸化后才能进行连接、导入。 （质粒为了防止发生自连进行了去磷酸化，这样就失去了磷酸键，还可以可目的基因片段连吗？还是必须给目的基因片段磷酸化，加上一个磷酸键，才能进行连接？）这块儿有点小蒙，求详解，先谢过！ |
回复此楼» 猜你喜欢
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有245人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 欲检测重组蛋白能否被磷酸化
已经有5人回复
- 在基因重组过程中，怎样鉴别质粒载体是否被限制性内切酶切好？
已经有10人回复
- 【有奖活动】回忆2010考研专业课题目
已经有54人回复
review
银虫 (著名写手)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 903.6
- 散金: 57
- 帖子: 1355
- 在线: 265.5小时
- 虫号: 988088
- 注册: 2010-04-02
- 专业: 植物资源学
2楼2012-10-25 13:51:52
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuliansheng: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢你的回复。能再问一个简单的问题吗？载体单酶切后需要去磷酸化，为什么目的片段单酶切后不用去磷酸化，在连接过程中不会发生自连，减低载体与目的片的连接效率吗？ 2012-10-26 14:02:25
感谢参与，应助指数 +1
yuliansheng: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢你的回复。能再问一个简单的问题吗？载体单酶切后需要去磷酸化，为什么目的片段单酶切后不用去磷酸化，在连接过程中不会发生自连，减低载体与目的片的连接效率吗？ 2012-10-26 14:02:25
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2012-10-25 17:01:57
4楼2012-10-25 17:20:30
5楼2014-04-17 18:53:10