| 查看: 1841 | 回复: 4 | ||
[求助]
关于基因重组过程中的去磷酸化和连接
|
|
在基因重组过程中，质粒载体单酶切后进行去磷酸化。目的片段通过PCR获得后，也进行酶切。这样获得的酶切质粒和目的基因片段可以直接连接，然后导入大肠杆菌的感受态细胞吗？还是要把目的基因片段进行磷酸化后才能进行连接、导入。 （质粒为了防止发生自连进行了去磷酸化，这样就失去了磷酸键，还可以可目的基因片段连吗？还是必须给目的基因片段磷酸化，加上一个磷酸键，才能进行连接？）这块儿有点小蒙，求详解，先谢过！ |
回复此楼» 猜你喜欢
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有230人回复
-
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner
已经有0人回复
-
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗
已经有0人回复
-
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner
已经有0人回复
-
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 欲检测重组蛋白能否被磷酸化
已经有5人回复
- 在基因重组过程中，怎样鉴别质粒载体是否被限制性内切酶切好？
已经有10人回复
- 【有奖活动】回忆2010考研专业课题目
已经有54人回复
review
银虫 (著名写手)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 903.6
- 散金: 57
- 帖子: 1355
- 在线: 265.5小时
- 虫号: 988088
- 注册: 2010-04-02
- 专业: 植物资源学
2楼2012-10-25 13:51:52
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuliansheng: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢你的回复。能再问一个简单的问题吗？载体单酶切后需要去磷酸化，为什么目的片段单酶切后不用去磷酸化，在连接过程中不会发生自连，减低载体与目的片的连接效率吗？ 2012-10-26 14:02:25
感谢参与，应助指数 +1
yuliansheng: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢你的回复。能再问一个简单的问题吗？载体单酶切后需要去磷酸化，为什么目的片段单酶切后不用去磷酸化，在连接过程中不会发生自连，减低载体与目的片的连接效率吗？ 2012-10-26 14:02:25
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2012-10-25 17:01:57
4楼2012-10-25 17:20:30
5楼2014-04-17 18:53:10