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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请问本身有抗性的菌株制备感受态全程需要加抗性吗
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jcjcj

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问本身有抗性的菌株制备感受态全程需要加抗性吗 已有1人参与

比如rosetta菌株，氯霉素抗性的，制备感受态的时候是不是每步都得加抗性呢，不然表达稀有密码子的质粒是不是会丢失？
谢谢~~
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1楼 2010-01-26 09:42:54
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
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我做的时候加抗性了，因为感受态的时候可以进去质粒，如果没有压力，同样也有可能丢失质粒。
以上仅仅是个人意见。
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Thank-you，so-blue.
2楼2010-01-26 10:47:54
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solopen

铜虫 (初入文坛)
★ ★
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司马诸葛(金币+1): 1-26 11:07
制备感受态的时候不需要加
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3楼2010-01-26 10:53:00
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towindflower

新虫 (初入文坛)
★
司马诸葛(金币+1): 1-26 11:07
不需要加
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4楼2010-01-26 11:02:37
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jcjcj

铜虫 (小有名气)
意见不一啊
到底要不要加呢
不是普通的bl21、top10之类无抗的啊
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5楼2010-01-26 11:42:33
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
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我制备过XL-blue，据说是有四环素抗性的，但是我没有加抗生素，感受态细胞制备的很好
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6楼2010-01-26 12:44:32
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pengl001

木虫 (小有名气)
我认为还是需要加的
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Yes,Ican!
7楼2010-01-26 13:15:42
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cheo163

金虫 (小有名气)
★
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我做rosetta菌种的感受态一直都加了chl抗生素的，没有试过不加是什么结果。但是一般本身不带抗性质粒的菌株，做感受态就没加。
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8楼2010-02-04 16:29:53
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luckydong1

铜虫 (小有名气)
★
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我觉得在培养对数菌的时候要加，如果你那个菌的抗性基因是以质粒的形式存在，不加抗性的话，质粒容易丢失。楼上有人提起的那种XL1-BLUE,这种菌的抗性是整合在菌基因组里，不存在质粒丢失的问题。接下来制备感受态的过程就一两个小时，菌又不会繁殖，这些操作就不用加了。我认为的
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9楼2010-02-08 14:38:37
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swordhang

金虫 (小有名气)
★
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加，你如果怕对你的感受态效果有影响的话，

你可以把酶连产物先转到Dh5哪一类的大肠杆菌中然后提质粒，用提取的质粒转化roseeta，那样的话你的感受态效果再怎么差应该也是可以得到一些转化子的
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10楼2010-06-27 10:57:05
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