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sunyu65045

木虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切的目的基因与质粒连接不上怎么办已有5人参与

我刚刚开始做分子克隆,将双酶切的基因片段大约1600bp与相同双酶切的质粒进行连接,电泳显示两个片段都很亮,酶切反应37摄氏度,2小时。使用T4 连接酶进行16摄氏度过夜连接,设置了阳性对照(仅含空质粒),在含有抗性的平板上进行涂布,结果阳性对照组长出很多菌落,而实验组几乎不长菌落,长出的菌落进行菌落PCR得到的条带也不是我所期望的,请大家帮帮忙,看我哪里出现了问题。
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

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sunyu65045(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-01 19:21:32

caihang

铜虫 (小有名气)

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sunyu65045(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-01 19:21:24

wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

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wangtailin

银虫 (小有名气)

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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-01 19:21:51
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