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双酶切的目的基因与质粒连接不上怎么办已有5人参与
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| 我刚刚开始做分子克隆,将双酶切的基因片段大约1600bp与相同双酶切的质粒进行连接,电泳显示两个片段都很亮,酶切反应37摄氏度,2小时。使用T4 连接酶进行16摄氏度过夜连接,设置了阳性对照(仅含空质粒),在含有抗性的平板上进行涂布,结果阳性对照组长出很多菌落,而实验组几乎不长菌落,长出的菌落进行菌落PCR得到的条带也不是我所期望的,请大家帮帮忙,看我哪里出现了问题。 |
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【求助/交流】质粒跟目的基因连接不上怎么办
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鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
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wangranjun
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wangtailin
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