24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3584  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

贤愚Libra

银虫 (正式写手)

[求助] 蓝白斑筛选挑取白色克隆用菌落PCR验证,除目的片段外还有一条带,什么原因? 已有3人参与

如题,引物T7/SP6,目的片段大小为450bp。

蓝白斑筛选挑取白色克隆用菌落PCR验证,除目的片段外还有一条带,什么原因?
T7-SP6.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

www------sr-------------
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
贤愚Libra(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-10 10:29:08
我们也用你这种marker,看上去确实目的条带太弱了,反而700多的条带很亮。不知道你连接的片段多大,是不是连了两个进去?另外,电泳图上半部分很亮,不知道是不是紫外光没照均匀?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-08-10 10:03:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader


【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
贤愚Libra(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-10 10:28:56
虽然不知道你的marker的大小,但感觉你的扩增产物可能不是你的target,也许是些非特异性扩增?特别许多产物大小还不一致?是不是这两个引物配对不是太好还是扩增条件未优化?有无阳性对照?(两个引物不会是同方向的 吧?)
2楼2014-08-10 09:48:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

贤愚Libra

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-10 09:48:46
虽然不知道你的marker的大小,但感觉你的扩增产物可能不是你的target,也许是些非特异性扩增?特别许多产物大小还不一致?是不是这两个引物配对不是太好还是扩增条件未优化?有无阳性对照?(两个引物不会是同方向的 ...

T7/SP6是T载体上的通用引物,应该不是引物的问题,我的marker是100bp的marker,最上面是1500,往下以此是1000bp,900bp,800bp……,上面的600-700bp间的带是我的目的片段,下面400-500bp间的带是不该出现的带。
www------sr-------------
3楼2014-08-10 10:01:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader


引用回帖:
3楼: Originally posted by 贤愚Libra at 2014-08-09 21:01:35
T7/SP6是T载体上的通用引物,应该不是引物的问题,我的marker是100bp的marker,最上面是1500,往下以此是1000bp,900bp,800bp……,上面的600-700bp间的带是我的目的片段,下面400-500bp间的带是不该出现的带。...

你不是说你的目的片段大小为450bp吗?
T7/SP6是测序引物吧,所以我怀疑这两个引物是否有可能都是正向(或反向)引物的可能性。
5楼2014-08-10 10:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 5/250 2026-04-17 10:02 by bobvan
[考研] 22408 312求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-14 25/1250 2026-04-16 21:21 by Art1977
[考研] 0831生医工第一轮调剂失败求助 +14 小熊睿睿_s 2026-04-11 18/900 2026-04-16 20:41 by lpl364211
[考研] 322求调剂 +8 123安康 2026-04-12 15/750 2026-04-16 11:07 by Espannnnnol
[考研] 290调剂生物0860 +38 哇哈哈,。 2026-04-11 44/2200 2026-04-16 09:52 by cuisz
[考研] 求助调剂,跨调 +19 X十甫寸Y 2026-04-11 20/1000 2026-04-15 21:18 by cuisz
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +9 lzmk 2026-04-14 10/500 2026-04-15 20:02 by 学员JpLReM
[考研] 通信工程求调剂!!! +6 zlb770521 2026-04-14 6/300 2026-04-15 20:00 by 学员JpLReM
[考研] 0854调剂 +13 长弓傲 2026-04-12 16/800 2026-04-15 13:45 by fenglj492
[考研] 复试调剂 +21 积极向上; 2026-04-10 23/1150 2026-04-15 12:50 by 西北望—风沙
[考研] 105500药学求调剂 +4 x_skys 2026-04-12 4/200 2026-04-14 13:37 by rndfc
[考研] 食品与营养(0955)271求调剂 +15 升格阿达 2026-04-12 16/800 2026-04-14 13:18 by 浮若_安生
[考研] 考研求调剂 +12 子木呐 2026-04-12 13/650 2026-04-14 01:19 by 王珺璞
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 一志愿浙大生物325分求调剂 +9 zysheng 2026-04-12 9/450 2026-04-12 22:31 by yuyin1233
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +8 hualkop 2026-04-11 8/400 2026-04-12 22:24 by fqwang
[考研] 调剂结束 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 广东省 085601 329分求调剂 +14 Eddieddd 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:58 by bljnqdcc
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
信息提示
请填处理意见