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wangcaijuan

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[求助] 菌落PCR挑菌时的条件问题

我是一个分子生物新手，做PCR也才3个月不到。最近需要做克隆了，老师建议用菌落PCR筛选阳性克隆菌株。今天上午挑了20多个菌落来做PCR。条件什么的我都明白，只是看了实验室其他人在挑菌时直接在实验台上操作，而不是在超净台里。于是我今天也就那样干了，划完菌留种后，把tip头扔到了PCR管子里。可心里始终没底儿，所以问问各位高手，挑菌和划板时不在超净台上操作，无所谓吗？

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1楼 2013-02-01 13:49:31

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cicelyzh

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

挑菌、划线都应该在超净工作台做。
实际上我是先无菌枪头挑单克隆，在另一个平板上点一下，并做好编号。然后再用这个枪头在PCR管里搅动若干下，P出阳性克隆后可以直接找对应编号的克隆，摇菌提质粒做进一步鉴定。

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2楼2013-02-02 12:53:42

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feilongtc07

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【答案】应助回帖

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wangcaijuan: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-02-05 15:08:23

其实做多了以后为了方便往往可能不在超净台里的~
严格来说应该菌落挑取什么都在超净台内~ 问题应该不大~

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3楼2013-02-04 13:27:31

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wangcaijuan

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引用回帖:

3楼: Originally posted by feilongtc07 at 2013-02-04 13:27:31
其实做多了以后为了方便往往可能不在超净台里的~
严格来说应该菌落挑取什么都在超净台内~ 问题应该不大~

谢谢回复~~反正已经那么做了。

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4楼2013-02-04 16:19:56

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wangcaijuan

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引用回帖:

2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-02-02 12:53:42
挑菌、划线都应该在超净工作台做。
实际上我是先无菌枪头挑单克隆，在另一个平板上点一下，并做好编号。然后再用这个枪头在PCR管里搅动若干下，P出阳性克隆后可以直接找对应编号的克隆，摇菌提质粒做进一步鉴定。

就是说这一系列都在超净台里弄吗？
包括把枪头扔到PCR管中也在超净台里？

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5楼2013-02-04 16:21:08

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