应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌落PCR挑菌时的条件问题
111/2返回列表12下一页
查看: 3516  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wangcaijuan

铁虫 (初入文坛)

[求助] 菌落PCR挑菌时的条件问题

我是一个分子生物新手，做PCR也才3个月不到。最近需要做克隆了，老师建议用菌落PCR筛选阳性克隆菌株。今天上午挑了20多个菌落来做PCR。条件什么的我都明白，只是看了实验室其他人在挑菌时直接在实验台上操作，而不是在超净台里。于是我今天也就那样干了，划完菌留种后，把tip头扔到了PCR管子里。可心里始终没底儿，所以问问各位高手，挑菌和划板时不在超净台上操作，无所谓吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-02-01 13:49:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
挑菌、划线都应该在超净工作台做。
实际上我是先无菌枪头挑单克隆，在另一个平板上点一下，并做好编号。然后再用这个枪头在PCR管里搅动若干下，P出阳性克隆后可以直接找对应编号的克隆，摇菌提质粒做进一步鉴定。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-02-02 12:53:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

feilongtc07

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wangcaijuan: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-02-05 15:08:23
其实做多了以后为了方便往往可能不在超净台里的~
严格来说应该菌落挑取什么都在超净台内~  问题应该不大~
赞一下 回复此楼
3楼2013-02-04 13:27:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangcaijuan

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by feilongtc07 at 2013-02-04 13:27:31
其实做多了以后为了方便往往可能不在超净台里的~
严格来说应该菌落挑取什么都在超净台内~  问题应该不大~

谢谢回复~~反正已经那么做了。
赞一下 回复此楼
4楼2013-02-04 16:19:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangcaijuan

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-02-02 12:53:42
挑菌、划线都应该在超净工作台做。
实际上我是先无菌枪头挑单克隆，在另一个平板上点一下，并做好编号。然后再用这个枪头在PCR管里搅动若干下，P出阳性克隆后可以直接找对应编号的克隆，摇菌提质粒做进一步鉴定。

就是说这一系列都在超净台里弄吗？
包括把枪头扔到PCR管中也在超净台里？
赞一下 回复此楼
5楼2013-02-04 16:21:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by wangcaijuan at 2013-02-04 16:21:08
就是说这一系列都在超净台里弄吗？
包括把枪头扔到PCR管中也在超净台里？...

是的。虽然PCR操作一般不需要在超净台里做，但挑菌的过程应该是无菌环境比较好。
赞一下 回复此楼
6楼2013-02-05 07:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangcaijuan

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-02-05 07:21:30
是的。虽然PCR操作一般不需要在超净台里做，但挑菌的过程应该是无菌环境比较好。...

多谢！下次开始注意起来~~
赞一下 回复此楼
7楼2013-02-05 11:07:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

主要看你们实验室环境，
我在美国这边实验室内空气10min换一次，倒LB也都在外面做，做了两年就污染过不超过5次。
挑菌什么的更无所谓了
赞一下 回复此楼
8楼2013-02-05 11:25:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangcaijuan

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-02-05 11:25:06
主要看你们实验室环境，
我在美国这边实验室内空气10min换一次，倒LB也都在外面做，做了两年就污染过不超过5次。
挑菌什么的更无所谓了

楼主悲催的在日本，这叫一个拥挤不堪。
赞一下 回复此楼
9楼2013-02-05 13:36:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by wangcaijuan at 2013-02-05 11:07:52
多谢！下次开始注意起来~~...

其实，即使不要求无菌的实验，细菌的操作也最好在超净工作台里，也可以减少工程菌扩散。
赞一下 回复此楼
10楼2013-02-05 14:03:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wangcaijuan 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿新疆大学085401，314分 +4 咔咔咔咔9 2026-04-05 4/200 2026-04-12 02:21 by 秋豆菜芽
[考研] 求助调剂，跨调 +11 X十甫寸Y 2026-04-11 11/550 2026-04-11 23:49 by 学zh
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +19 xaw. 2026-04-11 19/950 2026-04-11 23:20 by labixiaoqiao
[考研] 求调剂，985材料与化工348分 +7 涵竹刘 2026-04-11 9/450 2026-04-11 23:13 by 溪涧流水
[考研] 303求调剂 +14 SereinQ 2026-04-10 15/750 2026-04-11 20:43 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +6 青灯不负 2026-04-09 6/300 2026-04-11 20:35 by dongdian1
[考研] 295求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-05 7/350 2026-04-11 19:02 by laoshidan
[考研] 11408。358求调剂 +3 TMYzds 2026-04-07 3/150 2026-04-11 17:10 by 氮气气气
[考研] 本人女孩 +7 吼吼， 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 295求调剂 +3 桂秋二十八 2026-04-05 5/250 2026-04-11 11:36 by zhq0425
[考研] 085500求调剂材料 +10 易11122 2026-04-09 10/500 2026-04-11 10:39 by maddjdld
[考研] 296求调剂 +13 汪！？！ 2026-04-10 15/750 2026-04-11 10:31 by 逆水乘风
[考研] 吉大计算机技术331分，英语六级，求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 一志愿双非085400电子信息344 求调剂，对材料和化学方向也感兴趣 +8 无情的小羊 2026-04-09 9/450 2026-04-10 09:30 by 松花缸1201
[考研] 求调剂 +15 张zic 2026-04-05 16/800 2026-04-10 08:12 by kangsm
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 318求调剂 +13 ykyhsa 2026-04-05 15/750 2026-04-08 21:37 by wj165256
[考研] 0703化学调剂 348分 +14 唉我超真没招了 2026-04-06 15/750 2026-04-08 19:16 by 我减肥1
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 22:23 by hemengdong
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭