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汕头大学海洋科学接受调剂
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wangcaijuan

铁虫 (初入文坛)

[求助] 菌落PCR挑菌时的条件问题

我是一个分子生物新手,做PCR也才3个月不到。最近需要做克隆了,老师建议用菌落PCR筛选阳性克隆菌株。今天上午挑了20多个菌落来做PCR。条件什么的我都明白,只是看了实验室其他人在挑菌时直接在实验台上操作,而不是在超净台里。于是我今天也就那样干了,划完菌留种后,把tip头扔到了PCR管子里。可心里始终没底儿,所以问问各位高手,挑菌和划板时不在超净台上操作,无所谓吗?
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

主要看你们实验室环境,
我在美国这边实验室内空气10min换一次,倒LB也都在外面做,做了两年就污染过不超过5次。
挑菌什么的更无所谓了
8楼2013-02-05 11:25:06
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查看全部 11 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
挑菌、划线都应该在超净工作台做。
实际上我是先无菌枪头挑单克隆,在另一个平板上点一下,并做好编号。然后再用这个枪头在PCR管里搅动若干下,P出阳性克隆后可以直接找对应编号的克隆,摇菌提质粒做进一步鉴定。
2楼2013-02-02 12:53:42
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feilongtc07

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wangcaijuan: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-02-05 15:08:23
其实做多了以后为了方便往往可能不在超净台里的~
严格来说应该菌落挑取什么都在超净台内~  问题应该不大~
3楼2013-02-04 13:27:31
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wangcaijuan

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by feilongtc07 at 2013-02-04 13:27:31
其实做多了以后为了方便往往可能不在超净台里的~
严格来说应该菌落挑取什么都在超净台内~  问题应该不大~

谢谢回复~~反正已经那么做了。
4楼2013-02-04 16:19:56
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