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xingyun789

金虫 (小有名气)

[求助] 挑取单克隆后的PCR验证

我回收了一段目的基因,回收的浓度较低,电泳结果显示条带较弱,但能隐约看出来。然后我又进行了连接,转化,再挑取单克隆,然而在挑取的单克隆中,通过PCR,出现了不是我所需的目的条带,还请各位分析一下。出现这样的情况我该如何进行下一步的处理呢?
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lizanzan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是胶回收时污染了,建议重新PCR,胶回收
2楼2013-12-09 18:03:19
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不叶珏

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
多挑一些菌看看 也存在转化效率的问题
借你一生好不好
3楼2013-12-09 21:33:04
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-12-10 11:06:38
“在挑取的单克隆中,通过PCR,出现了不是我所需的目的条带” 这个克隆可能就是假的菌落,还有不知道你做菌落PCR的程序是什么样,希望写的详细一点好帮助你判断
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-12-09 21:39:22
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