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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我的单克隆菌落PCR除了很明确的目的条带外。在2000多上面还有微弱的两条带。
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fengyunqb

新虫 (小有名气)

[求助] 我的单克隆菌落PCR除了很明确的目的条带外。在2000多上面还有微弱的两条带。

我的单克隆菌落PCR除了很明确的目的条带外。在2000多上面还有微弱的两条带。不知道是什么条带。难道是菌的DNA？这样的情况下我能送去测序吗？有经验的朋友帮忙解释下呗。谢谢。
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1楼 2012-09-21 11:09:02
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回帖置顶 ( 共有1个 )

diandong

禁虫 (著名写手)
fengyunqb: 回帖置顶 2012-09-22 10:35:25
本帖内容被屏蔽
6楼2012-09-21 18:21:17
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普通回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢呢 2012-09-21 16:39:36
没关系的，可以拿去测序的，要指明你的目的片段的大小
测序公司测序的时候会先摇菌，抽提质粒，然后用这个纯化的质粒去测序的，所以没有关系，放心好了
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风雪夜归人
2楼2012-09-21 11:16:54
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ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-21 16:42:54
不知道楼主用的什么载体，如果有图的话就更好了
赞一下 回复此楼
有时候，一句话，可以改变未来
3楼2012-09-21 11:47:57
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fengyunqb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-21 11:47:57
不知道楼主用的什么载体，如果有图的话就更好了

跑的有点丑。跑的有点急。别笑话，哈哈。

第一次测序失败以后第二次准备测序菌落PCR结果，结果理想。准备测序。菌泥。.jpg
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4楼2012-09-21 16:42:01
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fengyunqb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-21 11:47:57
不知道楼主用的什么载体，如果有图的话就更好了

是PMD-18T。那个后面的弧线是胶的东西。
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5楼2012-09-21 16:47:34
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ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
fengyunqb: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-22 10:35:44
fengyunqb: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢哦 2012-09-22 19:31:33
引用回帖:
5楼: Originally posted by fengyunqb at 2012-09-21 16:47:34
是PMD-18T。那个后面的弧线是胶的东西。...

没有问题的，拿去测序吧，看测序结果就可以了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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有时候，一句话，可以改变未来
7楼2012-09-22 00:53:42
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huoyongting

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-09-22 19:31:20
没问题的，菌P的结果这样已经很好了，pMD-18T是高拷贝，上面的可能是质粒
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8楼2012-09-22 10:46:50
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houchm0927

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-09-22 19:31:02
pMD-18T基于高拷贝数的pUC18，我觉得应该是楼主菌落加的多了。但和楼上各位一样，我觉得可以测序。实在不放心，可以提质粒酶切检测一下，这样肯定靠谱
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9楼2012-09-22 15:44:27
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wdlnjau

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1, ★★★很有帮助, XIEXIE 2012-09-22 19:30:48
可以切胶测序，不影响你的目的片段，测序单上注明目的片段大小即可，我以前做过，测序后比对，有一部分序列的载体的序列。
赞一下 回复此楼
我们的心憧憬着未来，有的时候，现实也许会令我们沮丧，但是这一切都是暂时的、转瞬即逝的，而那些逝去的，终将变得可爱和美好。
10楼2012-09-22 15:55:33
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