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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我的单克隆菌落PCR除了很明确的目的条带外。在2000多上面还有微弱的两条带。
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)
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fengyunqb: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-23 15:43:58
本帖内容被屏蔽
11楼2012-09-23 14:19:53
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fengyunqb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by wcwluwei at 2012-09-23 14:19:53
我觉得你用的引物是不是你自己的基因引物而不是通用引物啊，可能出现非特异扩增了吧，就是你的引物和载体或者别的DNA扩增了别的东西。如果是通用引物扩增的话应该就是有菌液污染，还有就是验证阳性菌液最好不要菌液 ...

我的是自己设计的简并引物。没用通用引物，我也觉得是非特异性扩增，已经测序去了。希望有结果。谢谢你呢
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12楼2012-09-23 15:56:21
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
13楼2012-09-24 22:14:07
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fengyunqb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by wcwluwei at 2012-09-24 22:14:07
哪有检验用兼并引物的啊，至少用载体自带的引物检验啊不然哪能有说服力的啊。  不过结果出来看看就知道了...

测序结果已经出来了。结果很好。BLAST结果就是要找的基因。一切尽在掌握中。哈哈。谢谢帮助。测序是用的通用引物。我菌液PCR用的我的简并引物。
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14楼2012-09-25 09:54:58
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0551HE

新虫 (初入文坛)
我怎么提取质粒之后，跑胶结果还是有杂带，还能用于测序及后续的表达实验吗？
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15楼2012-09-25 15:05:48
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