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fengyunqb

新虫 (小有名气)

[求助] 我的单克隆菌落PCR除了很明确的目的条带外。在2000多上面还有微弱的两条带。

我的单克隆菌落PCR除了很明确的目的条带外。在2000多上面还有微弱的两条带。不知道是什么条带。难道是菌的DNA?这样的情况下我能送去测序吗?有经验的朋友帮忙解释下呗。谢谢。
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fengyunqb

新虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by wcwluwei at 2012-09-23 14:19:53
我觉得你用的引物是不是你自己的基因引物而不是通用引物啊,可能出现非特异扩增了吧,就是你的引物和载体或者别的DNA扩增了别的东西。如果是通用引物扩增的话应该就是有菌液污染,还有就是验证阳性菌液最好不要菌液 ...

我的是自己设计的简并引物。没用通用引物,我也觉得是非特异性扩增,已经测序去了。希望有结果。谢谢你呢
12楼2012-09-23 15:56:21
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢呢 2012-09-21 16:39:36
没关系的,可以拿去测序的,要指明你的目的片段的大小
测序公司测序的时候会先摇菌,抽提质粒,然后用这个纯化的质粒去测序的,所以没有关系,放心好了
风雪夜归人
2楼2012-09-21 11:16:54
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ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-21 16:42:54
不知道楼主用的什么载体,如果有图的话就更好了
有时候,一句话,可以改变未来
3楼2012-09-21 11:47:57
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fengyunqb

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-21 11:47:57
不知道楼主用的什么载体,如果有图的话就更好了

跑的有点丑。跑的有点急。别笑话,哈哈。

第一次测序失败以后第二次准备测序菌落PCR结果,结果理想。准备测序。菌泥。.jpg

4楼2012-09-21 16:42:01
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