| 查看: 1488 | 回复: 5 | ||
[求助]
有木有人知道“分离相似分子量的DNA分子的方法＂呢？
|
| 本人在实验中用通用引物PCR出来了混合样中的多个相同分子量DNA（相同长度bp）的，通过电泳只是一个条带，所以将条带切胶回收后连接载体导入大肠杆菌，挑选单一菌落进行扩繁以分离出相同分子量但不同序列的DNA分子，但是该过程有些复杂，有木有知道简便方法可以分离相同分子量的DNA的呢？谢谢 |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
GJ_Thoreau» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有80人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 十斗享清福，有木有？十簸箕十斗完美爱情有不有？
已经有17人回复
2楼2011-11-09 21:22:52
3楼2011-11-09 22:52:39
4楼2011-12-15 20:16:06
5楼2011-12-15 22:51:41
【答案】应助回帖
★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good! 2011-12-15 23:45:11
西瓜(金币+3): Good! 2011-12-15 23:45:11
|
denaturing gradient gel electrophoresis;DGGE 随着电泳凝胶中的变性剂浓度的增大，由双链DNA分子变性形成的单链分子的电泳迁移率发生变化。 双链DNA 分子在一般的聚丙烯酰胺凝胶电泳时，其迁移行为决定于其分子大小和电荷。不同长度的DNA 片段能够被区分开，但同样长度的DNA 片段在胶中的迁移行为一样，因此不能被区分。DGGE/TGGE 技术在一般的聚丙烯酰胺凝胶基础上，加入了变性剂（尿素和甲酰胺）梯度，从而能够把同样长度但序列不同的DNA 片段区分开来。一个特定的DNA 片段有其特有的序列组成，其序列组成决定了其解链区域(meltingdomain, MD)和解链行为(melting behavior) 。一个几百个碱基对的DNA 片段一般有几个解链区域，每个解链区域有一段连续的碱基对组成。  当变性剂浓度逐渐增加达到其最低的解链区域浓度时，该区域这一段连续的碱基对发生解链。当浓度度再升高依次达到各其他解链区域浓度时，这些区域也依次发生解链。直到变性剂浓度达到最高的解链区域浓度后，最高的解链区域也发生解链，从而双链DNA 完全解链。 |
6楼2011-12-15 22:52:44
