| 查看: 1293 | 回复: 6 | ||
love犬夜叉木虫 (小有名气)
|
[求助]
T载连接后进行双酶切结果什么都没有了已有2人参与
|
我是做定点突变，将突变的片段连到T载上，测序验证，用菌落PCR检验的时候都有目的条带，提的质粒也比19T的条带要大些，就是条带不止三条，差不多有五六条的样子，然后双酶切，做了几次了，都是一跑胶检测就是什么条带都看不到了，泳道也没有明显的亮带，的酶切体系是质粒7μl，BamH I 0.2,Hind III o.2,10X K Buffer 1,ddH2O 1.6,时间有过夜，也有4、5个小时的，以前构过T载，也做过双酶切， 但是都没有出现过这样的情况，求助啊！！！！！！实验进度拖得太久了~~~~(>_< ~~~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有295人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
帮忙看看这个双酶切的图
已经有10人回复- 双酶切后如何才能让载体自连？
已经有6人回复
- pMD18-T载体连接了目的片段后双酶切鉴定出现了好多条带 怎么回事?
已经有6人回复
- 目的基因连T载体能连上，双酶切后连不上HTB质粒，都三个月了，纠结啊。。。
已经有21人回复
- 酶切的片段跑时间长，小片段就没有了
已经有5人回复
- 提取重组质粒进行双酶切之后什么条带也没有，怎么回事？？
已经有7人回复
- 纠结的分子实验，双酶切连不上，求助
已经有14人回复
- 关于双酶切后回收的问题
已经有12人回复
- pET28a双酶切后连接目的基因，什么也不长。。。
已经有23人回复
- pMD18-T载体不需要酶切吗
已经有10人回复
- 有没有用过XmnI这个酶的?酶切后连接需要注意什么问题么？
已经有12人回复
- 双酶切后目的条带很淡，回收不到
已经有15人回复
- 双酶切之后，线状质粒的连接问题
已经有13人回复
- 双酶切没有切开，怎么回事啊
已经有6人回复
- 做双酶切 跑胶后什么都没有 是怎么回事？
已经有19人回复
- 载体和酶切片段连接的问题
已经有5人回复
- 双酶切后载体片段变小
已经有8人回复
- 目的片段与载体连接后无法检测出
已经有7人回复
- 双酶切，切不下来
已经有19人回复
- 双酶切粘性末端连接不上
已经有21人回复
- 将质粒上紧挨着的两个酶切位点进行双酶切后连接外源基因片段，是不是不好连接？
已经有13人回复
- PCR ， 双酶切，连接问题
已经有17人回复
- 双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点
已经有52人回复
- 【求助/交流】双酶切载体总是切不完全
已经有11人回复
love犬夜叉
木虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1526.6
- 散金: 200
- 红花: 1
- 帖子: 85
- 在线: 27.2小时
- 虫号: 2838266
- 注册: 2013-11-30
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2014-06-27 17:00:08
3楼2014-06-27 20:00:13
4楼2014-06-27 20:11:50
★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 20:54:21
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 20:54:21
|
本帖内容被屏蔽 |
5楼2014-06-29 23:11:40
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2014-06-30 16:24:55
love犬夜叉
木虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1526.6
- 散金: 200
- 红花: 1
- 帖子: 85
- 在线: 27.2小时
- 虫号: 2838266
- 注册: 2013-11-30
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
7楼2014-07-29 16:28:43