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T载连接后进行双酶切结果什么都没有了 已有2人参与
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我是做定点突变，将突变的片段连到T载上，测序验证，用菌落PCR检验的时候都有目的条带，提的质粒也比19T的条带要大些，就是条带不止三条，差不多有五六条的样子，然后双酶切，做了几次了，都是一跑胶检测就是什么条带都看不到了，泳道也没有明显的亮带，的酶切体系是质粒7μl，BamH I 0.2,Hind III o.2,10X K Buffer 1,ddH2O 1.6,时间有过夜，也有4、5个小时的，以前构过T载，也做过双酶切， 但是都没有出现过这样的情况，求助啊！！！！！！实验进度拖得太久了~~~~(>_< ~~~~ |
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5楼2014-06-29 23:11:40
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