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leiqin

新虫 (小有名气)

[交流] 帮忙看看这个双酶切的图已有1人参与

大侠请看:
左边第一个是15000marker,第二,第五个是质粒未酶切,第三个和第四个都是质粒双酶切,第六个是2000marker
不知道为什么双酶切的图中 有3条带,最下面是我的目的条带,但是上面在10000(载体片段)和7500处有两条带
这个7500处的带不是我希望的条带
不知道这是为什么?
重做做还是这样
是不是重新设计引物在做啊?
当时设计引物的时候是没有酶切位点的。
谢谢!

帮忙看看这个双酶切的图
2014.04.14 K1 9的双酶切验证,有问题1.jpg
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nono2009

超级版主 (文学泰斗)

No gains, no pains.

优秀区长优秀区长优秀区长优秀区长优秀版主

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
leiqin: 金币+2 2014-04-21 18:56:16
建议去相关专业版交流
2楼2014-04-16 09:23:59
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leiqin

新虫 (小有名气)

可能这个更加清楚一些
帮忙看看这个双酶切的图-1
2014.04.14 K1 9的双酶切验证,有问题4.jpg

3楼2014-04-16 09:24:39
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zq584605

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
leiqin: 金币+2 2014-04-21 18:56:26
首先可能是你的质粒开始就没切干净,你可以拿质粒上的酶切位点切下看看条带。
4楼2014-04-17 14:32:25
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
leiqin: 金币+2 2014-04-21 18:56:32
建议你把每条marker的大小在图上标记好,简略的说下你目的基因和载体的大小,这样大家比较容易看懂你在说什么
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
5楼2014-04-17 16:35:10
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周志惠

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
leiqin: 金币+2 2014-04-21 18:56:39
检查一下酶切位点有没有弄错吧
6楼2014-04-19 08:21:17
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allegory

禁虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
leiqin(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-20 14:33:01
leiqin: 金币+1 2014-04-21 18:57:43
本帖内容被屏蔽

7楼2014-04-19 21:28:27
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8楼2014-04-19 22:13:36
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leiqin

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 周志惠 at 2014-04-19 08:21:17
检查一下酶切位点有没有弄错吧

谢谢,没有弄错,不然根本切不开
9楼2014-04-21 18:54:08
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leiqin

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by allegory at 2014-04-19 21:28:27
你的描述后半部分完全没懂啊,做好泳道样品标记和marker片段数值,一目了然。
建议你把未酶切的、单酶切的对照、双酶切的样品,一切跑。这样更容易看出是哪个酶切出现的问题。

不会在图上做标签,谢谢!
我猜想是没有切干净,因为图上能看到切下来的目的片段,但是还有没有切开的质粒
10楼2014-04-21 18:55:54
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