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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 帮忙看看这个双酶切的图
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leiqin

新虫 (小有名气)

[交流] 帮忙看看这个双酶切的图 已有1人参与

大侠请看：
左边第一个是15000marker，第二，第五个是质粒未酶切，第三个和第四个都是质粒双酶切，第六个是2000marker
不知道为什么双酶切的图中 有3条带，最下面是我的目的条带，但是上面在10000（载体片段）和7500处有两条带
这个7500处的带不是我希望的条带
不知道这是为什么？
重做做还是这样
是不是重新设计引物在做啊？
当时设计引物的时候是没有酶切位点的。
谢谢！

帮忙看看这个双酶切的图
2014.04.14 K1 9的双酶切验证,有问题1.jpg
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1楼 2014-04-16 09:23:35
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nono2009

超级版主 (文学泰斗)

No gains, no pains.

优秀区长优秀区长优秀区长优秀区长优秀版主
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
leiqin: 金币+2 2014-04-21 18:56:16
建议去相关专业版交流
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2楼2014-04-16 09:23:59
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leiqin

新虫 (小有名气)
可能这个更加清楚一些
帮忙看看这个双酶切的图-1
2014.04.14 K1 9的双酶切验证,有问题4.jpg
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3楼2014-04-16 09:24:39
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zq584605

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
leiqin: 金币+2 2014-04-21 18:56:26
首先可能是你的质粒开始就没切干净，你可以拿质粒上的酶切位点切下看看条带。
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4楼2014-04-17 14:32:25
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
leiqin: 金币+2 2014-04-21 18:56:32
建议你把每条marker的大小在图上标记好，简略的说下你目的基因和载体的大小，这样大家比较容易看懂你在说什么
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
5楼2014-04-17 16:35:10
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周志惠

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
leiqin: 金币+2 2014-04-21 18:56:39
检查一下酶切位点有没有弄错吧
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6楼2014-04-19 08:21:17
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allegory

禁虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
leiqin(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-20 14:33:01
leiqin: 金币+1 2014-04-21 18:57:43
本帖内容被屏蔽
7楼2014-04-19 21:28:27
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郑克宁
8楼2014-04-19 22:13:36
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leiqin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 周志惠 at 2014-04-19 08:21:17
检查一下酶切位点有没有弄错吧

谢谢，没有弄错，不然根本切不开
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9楼2014-04-21 18:54:08
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leiqin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by allegory at 2014-04-19 21:28:27
你的描述后半部分完全没懂啊，做好泳道样品标记和marker片段数值，一目了然。
建议你把未酶切的、单酶切的对照、双酶切的样品，一切跑。这样更容易看出是哪个酶切出现的问题。

不会在图上做标签，谢谢！
我猜想是没有切干净，因为图上能看到切下来的目的片段，但是还有没有切开的质粒
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10楼2014-04-21 18:55:54
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